【www.zhangdahai.com--会计个人工作总结】
关键词:中药指纹图谱;质量控制;应用 中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1007―2349(2010)11―0069―03
1 引言
中药指纹图谱全称为中药化学指纹图谱,是指中药材经过适当的处理后,采用一定的分析手段和仪器检测得到的能够标识其中各种组分群体特征的共有峰的图谱,是以系统的化学成分研究和药理学研究为基础,经化学测定或基因鉴定得到的某种或某产地中药及其制剂所共有的、具有特异性的组分群体(某类或数类成分)特征图谱或图像。中药的质量控制涉及到从原料到成品的每一环节,有其自己的特殊性。尽管在药品的质量标准中可建立多种检验方法,但由于中药尤其是中成药的成分十分复杂,现阶段不能做到对每种成分的逐一鉴定,而中药指纹图谱能比较全面反映中药中所含化学成分的种类与数量,尤其是在现阶段有效成分绝大多数没有明确的情况下,将能更好地表明中药的内在质量,大大提高中药质量控制和评价的技术水平和科技含量,成为建立现代中药质量标准体系的核心。
2 指纹图谱分析技术的发展现状
目前获得指纹图谱的主要手段有:①色谱法:包括传统的薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、高效毛细管电泳法(HPCE);②光谱法:包括紫外光谱法、红外光谱法、近红外光谱法;③其他方法:主要有x一射线衍射法、核磁共振法(NMR)、质谱法(Ms)、色谱联用技术和DNA指纹图谱。
日前,由中国科学院长春应化所和吉林大学、中国农科院特产所共同承担的“龙胆草等长白山道地中药材多维指纹图谱研究”取得突破。经专家鉴定,该项目为中药的质量控制提供了新的技术和方法,其实验手段和技术达到国际先进水平。
3 中药指纹图谱在质量控制中的应用
国际社会对药品的要求是“安全、有效、可控”。近年来,指纹图谱技术被认为是中药质量控制研究的有效手段。指纹图谱是基于对中药物质群整体作用的认识,借助于波谱和色谱等技术获得中药化学成分的光谱或色谱图,是实现鉴别中药真实性、评价质量一致性和产品稳定性的可行模式,有着较为广泛的影响和应用。中药指纹图谱能比较全面地反映中药中所含化学成分的种类与数量,尤其是在现阶段有效成分绝大多数没有明确的情况下,能更好地反映中药的内在质量。目前中药指纹图谱已成为国内外公认的鉴别中药品种和评价中药质量的最有效手段。
3.1 我国中药质量控制的现状现行的中药质量标准,对中药材、中成药的质量控制是以传统的性状鉴别和显微鉴别来确定真伪,以理化鉴别评价优劣,只有少数药材对其1～2个指标成分进行检测和控制,但从传统的中医药观点来看,指标成分的控制难以真正控制中药的功效,尤其是复方制剂,检测任何一种活性成分均不能反映其所体现的整体疗效,中医辨证施治用的是药味而非某个化学成分。所以要控制中药的质量,不能只针对某几种化学成分,必须对方剂的物质群整体予以控制。这是中药与化学合成药品质量标准的根本区别。如何在现行的中药质量标准的基础上,增加现代核心技术是目前面临的重要任务。
3.2 我国中药指纹图谱建立的重要性及相关法规
中药指纹图谱是中药鉴定及其质量控制的核心技术,它不仅是一种中药质量控制模式和技术,更是一种进行中药理论研究和新药开发的模式和方法。
我国国家食品药品监督管理局2000年8月颁发了《中药注射剂指纹图谱检测标准研究指导原则》,中药注射剂已强制实行中药指纹图谱质量标准指标,一批中药注射剂:注射用丹红(粉针剂)、注射用双黄连(冻干)、注射用辛芍(冻干粉针)18]、清开灵注射剂等相继建立了指纹图谱质量标准。2003年国家科技部将指纹图谱研究列入“十五”重点攻关专项。近几年国家攻关计划中“常用中药的品种整理与质量研究”项目的开展,已经对200余种常用中药的本草考证、来源、产地、指标性成分含量测定等进行了系统研究。
3.3 中药指纹图谱的发展及应用
中药指纹图谱的方法虽然很多,但色谱法仍是最主要的方法,尤其是TLC、HPLC、GC、HPLC\MS联用色谱技术,已成为中药分析中几种常规的分析手段。现将近几年来最常用的几种指纹图谱(色谱法)的应用加以介绍。
3.3.1 薄层色谱(TLC)指纹图谱技术TLC操作简便、快速、经济,且能提供直观形象的可见光或荧光图像,即较柱色谱多了色彩这一可比“参数”,并可进一步配合色谱扫描或数码处理得到不同层次轮廓图谱和相应的积分数据。尤其适合日常分析检验和现场检验。高晓霞等用薄层扫描法对10份不同采集地的何首乌样品的色谱图以峰高进行主成分分析和聚类分析,获得的11个共有指纹峰构成了何首乌中蒽醌类和二苯乙烯苷类成分的TLC指纹图谱,用此图谱可快速有效地鉴别何首乌并评价其质量。在实际的薄层层析鉴别中,有时因中药的成分性质相近而难以分开时,还可以采用高效薄层层析法(HPTLC),该法采用更细更匀的吸附剂,因而提高了分离效果,使斑点小而圆,重现性增强,达到微量、快速和高效的目的。
3.3.2 高效液相(HPLC)指纹图谱技术HPLC在药检,特别是化学分析方面已有相当长的历史,我国药典中对一些中草药指定成分的分析(但不是指纹图谱)也采用了HPLC方法。HPLC由于具有分离效能高、分析速度快、重现性好的特点,且由于是封闭的系统色谱,在线操作,外界影响因素少,色谱稳定性好,检测方法可选性较大,故很适合指纹图谱的研究,近年来发展很快。粟晓黎等以鬼臼所含毒性成分为分析对象,选择适宜的HPLC分析条件,建立了指纹图谱分析方法,得出鬼臼指纹图谱与威灵仙、龙胆HPLC图谱截然不同,指出HPLC指纹谱分析可简便快速地鉴别鬼臼、龙胆和威灵仙。古锐等以民族药广枣、冀首草、沙棘及川产道地药材川芎为例,采用化学计量的方法,用具体实验说明了HPLC指纹图谱在药材品种鉴定、药用部位界定、产地加工及道地特征分析4个方面的应用。
3.3.3 气相色谱(Gc)指纹图谱技术
GC适用于挥发性组分的分离检测,在中药指纹图谱的研究中进行的较早。具有高效、高选择性、高灵敏度、用量少、分析速度快等特点。张敏娜等建立了泽泻药材的GC指纹图谱,系统地反映了泽泻药材中挥发性成分的全貌,为其质量评价提供参考。杨华生等建立了10批木香样品的GC指纹图谱,用其“整体性”、“模糊性”的评价,对木香饮片整体质量进行控制。李晓波等为更好控制野菊花注射剂的质量,在建立HPLC指纹图谱的基础上,又建立了野菊花注射液中挥发油类成分的GC指纹图谱,可全面地控制和评价该注射液的质量。另外以超临界CO2流体萃取作为前处理手段的气相色谱一质谱分析法,也大大丰富了中药指纹图谱构建的内涵。
3.3.4 色谱联用指纹图谱(即多维指纹图谱)
由于中药复方 制剂成分的复杂性,现行的各种单一色谱方法给出的信息仍然不足以构建较完善的指纹图谱,因此,罗国安等研究人员提出了多维指纹谱的概念。所谓多维,即采用多种分析仪器联用技术,比如液相色谱一质谱、液相色谱一质谱一质谱、气相色谱一质谱等,将以上2种方法的优势集中起来,扬长避短,在分离各成分的同时,也能在线提供活性成分的化学结构信息,是分析检测成分复杂而指纹特征信号弱的样品最有力的分析方法,特别是为解决中药研究中缺乏标准品的难题提供了一条可行的途径。
HPLC/MS将HPLC的高分离效能与MS强大的检测功能组合起来,随着接口技术的成熟和质谱检测器离子源种类的增多.逐渐在中药指纹图谱的研究中得到广泛应用。石世学等采用气相色谱一质谱法分析10批川芎挥发油化学成分,标定共有峰和确定特征指纹峰。结果鉴定出13个共有峰,确定其中8个共有峰为其特征指纹峰。采用该方法建立的川芎挥发油特征指纹图谱,其特征性和专属性强,可作为川芎药材质量控制的有效手段。陈卫东建立了离线裂解一气相色谱一质谱联用法研究中药材指纹图谱的测定方法。
4 思考与前景展望
4.1 存在的不足我国对中药指纹图谱的研究还处于探索阶段,存在的问题还比较多。原料药材质量的提高和稳定是制剂指纹图谱能否成功建立的首要问题生产工艺的规范和优化是研究实施指纹图谱的另一个重要环节;需解决中药及其制剂代表性化学成分的选定和代表性化学成分的表征方法;指纹图谱实验方法学严格验证是图谱达到专属稳定的保障;指纹图谱的辨认和判断,中药制剂指纹图谱具有一定的模糊特点,需要建立一套完整的数学拟合方法即相似判断标准。因此,从个别中药及其产品指纹图谱方法的研究到逐步实现所有中药的指纹图谱质量控制,从各种不同领域指纹图谱分析及评价方法的研究到系列规范化标准的建立,是一项长期而艰巨的任务,这需要学术界和产业界的共同努力。
4.2 前景展望
当然,中药指纹图谱的发展前景是非常看好的,在以下几个方面将大有作为:(1)提出合理的、易于实施的指纹图谱相似性分析方法并开发相应的软件,与分析仪器相配套,用于生产企业和药品检验部门的质量控制、评判;(2)开发基于各类指纹图谱分析的中药材分析、鉴定、分类评判的软件和网络平台,服务于各有关部门、企业和机构。(3)开发和建立在线指纹图谱检测技术、分析软件与基于指纹图谱信息的生产自控程序,实现利用指纹图谱对中药生产过程的控制。(4)建立道地药材指纹图谱数据库和网络平台。(5)易延逵等考虑给复方中每一类成分制定一个指纹图谱,即制定出复方中药制剂的“全指纹图谱系”,是一种从整体性、特征性、有效性和安全性高度研究中药的全新学科体系。总之,中药指纹图谱有重要应用前景,随着中医药现代化的发展,一定会发挥更大的作用。
