酶联免疫(STE)法检测血浆Hcy的应用研究:酶联免疫检测

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  【摘要】 目的 探讨血浆Hcy水平与脑血管疾病之间的关系,从而为脑血管疾病的防治提供参考性意见。方法对本院2008年3月至2009年5月收治脑卒中患者59例进行回顾性分析,用酶联免疫法测定血浆Hcy。结果 脑卒中组患者血浆Hcy显著高于对照组;脑梗死组和脑出血组患者血浆Hcy比较没有统计学差异;老年组与非老年组患者血浆Hcy比较无统计学差异;首发组患者血浆Hcy显著低于复发组。结论 血Hcy水平增高是脑卒中危险因素之一,酶联免疫法准确性高,可用于基层医院及实验室血浆Hcy浓度的检测工作及大宗临床病例的筛查。
  【关键词】 酶联免疫;血浆Hcy;脑血管
  
  作者单位:675400云南省楚雄州大姚县人民医院检验科
  
  
  心脑血管疾病是危害人类生命的严重疾病之一,脑卒中是中老年人致残和认知障碍的主要原因[1]。目前已得到世界公认的高血压、糖尿病、高脂血症、吸烟、饮酒等是脑卒中发生的重要危险因素,控制这些危险因素可以预防脑血管疾病的发生。但近年的临床研究发现一些脑血管疾病患者并无上述危险因素。因此,需寻找新的脑血管疾病危险因素,提高对脑血管疾病发病机制的认识,制订新的防治策略则显得更为重要。1962年,Gerritsent等[2],Carson等[3],指出氨基酸代谢障碍致Hcy尿症患者血浆中Hcy积聚,并自尿中大量排出,形成Hcy尿,患者表现出智力发育迟滞及晶状体脱位。近年越来越多的研究表明,血中同型半脱氨酸( homocysteine, Hcy)含量的升高与脑动脉硬化及血栓的形成密切相关。本研究对本院2008年3月至2009年5月收治脑卒中患者59例进行回顾性分析,用酶联免疫法测定血浆Hcy,探讨血浆Hcy水平与脑血管疾病之间的关系,从而为脑血管疾病的防治提供参考性意见。
  1 临床资料
  1.1 一般资料 本院2008年3月至2009年5月收治脑卒中患者59例,男37例,女22例,诊断符合1995年第四届全国脑血管病会议修订的诊断标准[4],经头部CT或MRI证实。入院3 d内病情稳定后完成神经功能缺损程度评分、脑梗死患者按OCSP脑梗死临床分型[5]。另选同15例非脑血管疾病患者作为正常对照组,男8例,女7例,年龄及性别与病例组比较无统计学差异(P>0.05),入选患者均排除心、肾、肝、代谢疾病及消化系统疾病、营养不良。
   59例脑卒中患者,根据脑血管疾病类型,分为脑梗死组41例,脑出血组18例。按患者年龄,分为老年组(>60岁)35例,非老年组(   测定Hcy的方法有放射酶分析法、气相色谱质谱分析法(GC-MS )、液相色谱质谱分析法(LC-MS )、HPLC-荧光检测法、HPLC-电化学法、毛细电泳法、酶联免疫法(ELISA)、荧光偏振免疫分析法(FPIA)和高效液相色谱分析法(HPLC),后三种方法是目前最常用的方法。HPLC法和FPIA法对检测仪器及技术要求高,检测成本高,不易在普通实验室及基层医院开展血Hcy浓度的检测工作。因此应用既简便,又准确实用的Hcy检测方法对临床上患脑卒中的患者进行检查及大宗健康人群的血Hcy普查就显得十分重要。本研究采用ELISA (STE)法对患者进行血Hcy测定,其优点是对样本无需预处理及色谱分析,操作简单,技术和设备要求不高,成本低,精密度和特异性高,检测速度快。
  大规模的前瞻随机对照试验表明,逆转高Hcy血症治疗可使心脑血管病发病率及病死率降低。但引起血浆Hcy的因素有很多,基因水平的治疗目前比较困难,那么纠正其致病并促其恶化的因素-维生素缺乏便显得十分重要。研究显示,联合应用维生素B6、B12及叶酸能使95%高Hcy血症患者的血浆Hcy值降至正常范围[8],能有效的减少心脑血管疾病的发生。但是,这种治疗能否改变动脉粥样硬化的病理过程,以及补充维生素后的远期效果如何,停药后有无反复,尚需进一步研究。近年来,发现药物普罗布考是临床上最强的杭氧化药物,它能保护动脉内皮不受氧化损伤,防止平滑肌细胞向内膜迁移和增殖。如果该类药物在应用于Hcy导致血管内皮细胞损伤及平滑肌细胞增殖的拮抗试验中取得成功,则对于治疗高Hcy症具有潜在的临床应用价值。总之,血Hcy水平增高是脑卒中的一个危险因素,高Hcy血症的早期发现和早期纠正,可能会成为治疗和预防缺血性脑卒中的一个重要途径,血浆Hcy的测定将会与血脂、血糖一样成为脑血管疾病患者临床常规的检测项目。酶联免疫(STE)法准确性高,可用于基层医院及实验室血浆Hcy浓度的检测工作及大宗临床病例的筛查。
  参 考 文 献
  [1] 黄如训.脑卒中.人民卫生出版社,2001:2.
  [2] Gerritsent T, Vaughn JG, Waisman HA.The identification of homocystine in the uine.Biochem Biophys Res Commun, 1962,9:493.
  [3] Carson NAJ, Neill DW.Metabolic abnormalities detected in a survey of mentall backward individuals in Northern Ireland. Arch Dis Child, 1962,37:505.
  [4] 中华神经科学会.中华神经外科学会.各类脑血管疾病诊断要点.中华神经科杂志,1996,29(6):379.
  [5] Bamford J, Sandercock P, Dennis M, et al.Classification and natural history of clinically identifiable subtypes of cerebral infarction. Lancet, 1991,337(8756): 1521.
  [6] 中华神经科学会,中华神经外科学会.脑卒中患者临床神经功能缺损程度评分标准(1995).中华神经科杂志,1996, 29(6):381.
  [7] Gauthier GM, Keevil JG, Mcbride PE. The association of homocysteine and coronary artery disease. Clin Cardiol, 2003,26:563.
  [8] Conri C, Constans J, Parrot F, et al. Inverted question mark homocysteinemia: role in vascular disease. Press Med, 2000,29(13):737.

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