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【摘要】目的 :通过检测哮喘患儿诱导痰嗜酸粒细胞趋化蛋白(Eotaxin),探讨eotaxin在哮喘发病中作用。方法:用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测哮喘急性发作组45例,缓解组34例,健康对照组40例诱导痰中Eotaxin含量。结果:哮喘急性发作组诱导痰Eotaxin水平高于缓解期组及健康对照组,差异有统计学意义(P0.05)。急性发作中、重度组Eotaxin水平高于轻度组,差异有统计学意义(P[1]。本研究通过测定哮喘患儿诱导痰 Eotaxin的水平,探讨Eotaxin在哮喘发病中的作用。
1 对象和方法
1.1 对象:
①哮喘急性发作组:患儿45例,男28例,女17例,年龄5~14岁,平均8.5岁。根据《儿童支气管哮喘防治常规》中的诊断标准[2],按临床表现分为轻度和中重度两组,其中中重度组16例,轻度组29例,所有患儿研究前无免疫治疗史及类固醇用药史。
②哮喘缓解期组:患儿34例,男22例,女12例,年龄6~15岁,平均年龄8.9岁。所有患儿近3个月无哮喘急性发作。
③健康对照组:正常儿童40名,男24名,女16名,年龄5~15岁,平均年龄8.7岁。近期无感染史及用药史,无家族过敏史和哮喘史。
1.2 方法:①诱导痰方法:诱导痰技术参考文献报道方法[3],若出现喘息,则停止操作。②痰液质控标准:显微镜下观察鳞状上皮细胞小于5%并可见肺巨噬细胞时认为是合格痰液, 收集的痰液在1h内处理,处理前4℃冰箱保存。③诱导痰上清液Eotaxin浓度测定:采用夹心法酶联吸附试验(ELISA)检测Eotaxin浓度,试剂盒购自美国R&Systems公司,具体操作步骤严格按试剂盒说明书操作。
1.3 统计学方法:采用方差分析,配对t检验,数据以(±s)表示,以P0.05)。Eotaxin水平三组之间差异有统计学意义(F=9.57, P0.05)(表1)。
2.2 哮喘急性发作期病情严重程度与Eotaxin水平的关系:哮喘急性发作期Eotaxin水平与临床病情严重程度有关,中重度组16例Eotaxin水平为(103.25±6.87)ng/L,高于轻度组29例的(75.04±9.48)ng/L,差异有统计学意义(t=3.634, P[5]。有研究表明血清Eotaxin的表达水平与哮喘的急性发作和临床严重程度相关[6]。
诱导痰方法有直接、无创、简单安全、重复性好等优点,痰中检出的炎性细胞和细胞因子、炎症介质,能确切反映气道炎症。但对哮喘患儿诱导痰中Eotaxin研究甚少。有研究发现哮喘儿童痰Eotaxin无变化,从而认为中性粒细胞而非嗜酸粒细胞在儿童哮喘的发病中扮演重要角色。但亦有研究发现哮喘儿童诱导痰中Eotaxin含量,发作组高于缓解组和对照组,认为Eotaxin升高是反映哮喘急性发作的指标 [7]。
本研究结果表明,当哮喘急性发作时患儿痰Eotaxin升高,显著高于缓解组和健康对照组,缓解组与对照组比较无显著性差异。既往研究发现, EotaxinmRNA的表达与气道高反应的严重程度呈正相关。本研究发现当哮喘急性发作时痰Eotaxin升高水平与临床病情严重程度有关。本研究结果表明,诱导痰Eotaxin水平能反映哮喘气道炎症情况及疾病的严重程度,诱导痰Eotaxin可作为哮喘急性发作期诊断指标,对判断儿童哮喘严重度及炎症控制情况、指导治疗、了解预后等均有重要价值。
参考文献
[1] Gauvreau GM, Watson RM, O’Byme PM, Kinetics of allergen induced airway eosinophilic cytokine production and airway inflammation[J].Am J Respir Crit Care Med,1999,160(2):640-647
[2] 中华医学会儿科分会哮喘学组.儿童支气管哮喘防治常规(试行)[J].中华儿科杂志,2004,42(2):100-104
[3]Pavord ID, Pizzichni M, Pizzichini E, et al, The use of induced sputum to investigate airway Inflammation. Thorax,1997,52:498-501
[4] Mattoli S, StaceyMA, Sun G, et al. Eotaxin expression and eosinophilic inflammation in asthma. Biochem Biophys Res Commun, 1997, 236:299-301
[5] 李昌崇,林剑,李孟荣,等.哮喘儿童嗜酸性粒细胞趋化蛋白的测定及其临床意义,中华儿科杂志,2002(40):602-604
[6] 韩志英.哮喘儿童诱导痰Eotaxin、嗜酸性粒细胞与血免疫球蛋白、T细胞亚群水平变化及临床意义[D]. 山西医科大学, 2006
[7] Ying S, Robinson DS, Meng Q, et al. Enhanced expression of eotaxinand CCR3 mRNA and protein in atopic asthma. Association with airway hyperresponsiveness and predominant co-localization of eotaxin mRNA to bronchial epithelial and endothelial cells. Eur J Immunol, 1997, 27:3507-3516
作者单位:515041 广东省汕头大学医学院第一附属医院
