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[摘要] 细胞形态学检验是血液病防治、诊断、鉴别诊断及预后判断的关键,笔者通过总结检验过程中的注意事项,从而提高血细胞形态学检验的质量。 [关键词] 血细胞;形态学;措施
[中图分类号] R446.1[文献标识码]C [文章编号]1674-4721(2010)03(b)-057-01
血细胞形态学检验是血液病基础诊断与常规血液学检验的重要项目,是最基本的简便实用的检查方法[1]。血细胞形态学检验主要包括骨髓及外周血细胞形态学检验两部分。血细胞形态学检验质量的高低是许多疾病尤其是血液病的防治、诊断、鉴别诊断及预后判断的关键[2]。现在血液分析仪越来越普及,检验人员忽视了涂片镜检,同时血细胞形态学检验主观性较强,工作人员要积累一定工作经验,作为基层单位的检验人员应如何提高血细胞形态学检验质量,笔者体会应作好下面几点工作:
1 载玻片的清洁
新购置的玻片用1%的稀盐酸浸泡24 h,除去游离碱质,再用流水冲洗干净。必要时用95%乙醇浸泡1 h,然后擦干或烘干备用。复用玻片, 若有血膜,置于1%的十二烷基磺酸溶液中浸泡过夜,去除血膜,再用自来水清洗干净,烘干备用。
2 染液及染色方法
瑞氏色素质量要纯,甲醇必须用AR(无丙酮)。贮存的染液倒出后不能放置过久,因为甲醇挥发,或氧化成甲酸,使着色不良,导致染色失败。染色用混合(瑞-姬氏)法较好。染色时间要根据环境温度灵活掌握,可将带染液的波片置于显微镜下观察,当有核细胞着色良好时(核浆清晰可辨)再染1~2 min,用中性流水冲洗干净。
3 高素质检验人员的培养
细胞形态学检验技术是多学科联合的、要求较高的技术,形态学检验专业人员应具有较高的素质。基层医院建立单独的形态学检查科室有一定困难,可采用传、帮、带的方式培训专业人员。检验科要有一人专修形态学检验,科内采用每月的业务学习时间轮训,不断提高形态学诊断水平。
4骨髓取材与涂片
由于血液及骨髓中有核细胞形态大小、比重等生物活性物质和制片技术个体间的差异,使其分布不均,影响制片的质量,所以采集标本、制片及染色的质量控制是保证标本质量的关键。骨髓抽取要顺利、适量,可见较多的骨髓小粒,油滴,显微镜下可见骨髓特有细胞,中性杆状核与分叶核粒细胞的比值大于外周血。涂片要迅速,以免凝固。涂片时可在放骨髓液的玻片下面一头垫两张玻片,使稀骨髓液流开,取黏稠部分推片。涂片厚薄均匀,头体尾分明。手持涂片,迅速摇动使其风干,或用电吹风吹干,以免细胞变形、固缩。不能置于煤炉上方烘干,以免着色不良。
5骨髓涂片的观察
理论上掌握各系统各阶段血(骨髓)细胞的形态特征。首先用低倍镜观察整张涂片,观察涂片、染色是否合格,了解骨髓有核细胞增生程度,观察全片计数巨核细胞数,尤其注意观察片尾和周边部位有无巨大细胞和异常细胞。油镜观察细胞形态、比例、分类计数。选择能代表骨髓大致情况的部位,即将有核细胞分布均匀、形态舒展、清晰可辨的涂片进行观察和分类。至少分类计数200个有核细胞,必要时分类500个(根据有核细胞增生程度定,增生低下的少计,增生明显的多计)。灵活应用低倍镜调换油镜,低倍镜是发现异常细胞的重要手段,油镜是辨别判定异常性质的工具。当辨认某一个或某一类不典型细胞时,单纯的形态学是有一定欠缺的,应多观察视野和涂片,并参考其他资料,做组化染色等来确定。可以根据细胞出现的频率和伴随细胞来确定,如中幼红细胞和小淋巴细胞,在血片中小淋巴出现的频率大,在骨髓中中幼红出现的频率大。原粒和原单,伴随细胞是中晚幼粒就判定为原粒,伴随细胞是单核就判定为原单。
6 重视与临床医学的联系
血细胞形态学检验与临床医学密不可分,诊断主要依靠形态学检验结果,但必须结合患者的临床表现、阳性体征和其他检查资料[3]。熟知和了解血液病的有关临床知识,以便作出正确的实验报告。
7参与室间质评
积极参与区域性乃至全国性的血液病室间质评活动,通过室间质评将自己的检验结果与其他实验室结果进行比对,找出差距,进行改进。骨髓涂片或血涂片的细胞形态观察具有形态多变的复查性,需要不断提高工作质量,学习外界的先进经验,不断提高检验结果的准确性和可靠性。
[参考文献]
[1]朱伟,许文荣.血细胞形态学质量控制[J].临床检验杂志,2008,26(1):1-2.
[2]郭小平.血细胞形态学检验质量控制及临床意义[J].现代中西医结合杂志,2004,13(22):92-93.
[3]景戌.血细胞形态检查的质量控制及临床意义[J].检验医学与临床,2008,32(3):14-15.
(收稿日期:2010-01-21)
