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【摘要】 目的 建立通阳活血颗粒中主要成分的定性鉴别方法，为制定其质量标准提供依据。方法 采用薄层色谱法(TLC法)对颗粒中的黄芪、红花两种有效成分进行定性分析。结果 供试品与对照品，对照药材薄层图谱斑点相同并清晰，均能鉴别出黄芪、红花。结论 薄层色谱专属性强，操作简便，重现性好，可用于通阳活血颗粒的质量控制。
【关键词】颗粒；薄层色谱；鉴别；黄芪；红花
TLC identification of granular preparation of tongyanghuoxue
HUO Zuan-yun，CHEN Shu-ying.ChineseTraditionalMedicalHospitalofFoshan，Guangdong 528000,China
【Abstract】 Objective Providing scientific basis for quality standards established by establishing the qualitative analysis of the most effective composition in the granular preparation of Tongyanghuoxue.Methods Effective compositions of Flos Carthami and Radix Astragali were identified by TLC.Results In the TLC of the testing samples，same color spots were noted at the corresponding sites of the reference substances and effective compositions of Flos Carthami and Radix Astragali can be identified by TLC.Conclusion The reproducibility and the specialization of the TLC were good.The method was simple and convenient，which can be used for quality control of the granular preparation of Tongyanghuoxue.
【Key words】Granular preparation; TLC; Identification；Radix astragali；Flos carthami
通阳活血颗粒是本院的一种中药制剂，由黄芪、红花、地龙等中药材制成，具有益气活血，除痰通络的功效。主要用于气虚痰瘀证，如强直脊椎炎，风湿性关节炎，类风湿关节炎，增生性骨关节炎及坐骨神经痛。症见疼痛日久，肢体麻木，骨节僵硬等，亦用于中风之半身不遂，口眼歪斜等。经过长时间的临床应用，通阳活血颗粒对上述症状有明显的疗效，为了更好地保证该制剂的质量，对颗粒中的君药黄芪、红花进行薄层色谱鉴别，为制定其质量标准提供理论依据。
1 实验仪器、原料与试剂
ZF-90型电暗箱式紫外线灯投射仪(上海顾村电光仪器厂)；超声波清洗器；萃取装置；回流提取装置；硅胶G(青岛海洋化工有限公司)；玻璃点样毛细管(华西医科大学仪器厂)；黄芪对照药材(批号：20080110)；红花对照药材(批号： 20080221)；黄芪甲苷标准品、对照品均
购自中国药品生物制品检定所；所用中药材由广州致信药业有限公司提供；试剂均为分析纯。
2 实验方法与实验结果
2.1 黄芪薄层色谱鉴别［1-2］
2.1.1 供试品制备 取本品3 g，研细，加甲醇40 ml，超声处理20 min，放冷,滤过,滤液蒸干,残渣加水15 ml,分次溶解,加乙醚提取2次,每次15 ml,弃去乙醚液,水液用水饱和的正丁醇振摇提取2次,每次15 ml,合并正丁醇提取液,加氨试液提取2次,每次20 ml,弃去氨液,将正丁醇水浴蒸干,残渣加甲醇1 ml溶解,作为供试品溶液。
2.1.2 标准品制备方法 取黄芪甲苷对照品,加甲醇制成每1 ml含0.5 mg的溶液,作为对照品溶液。
2.1.3 对照药材溶液制备 取黄芪对照药材适量，加甲醇20 ml,加热回流1 h，滤过，滤液加于中性氧化铝柱(100~120目，5 g，内径10~15 mm)上，用40%甲醇100 ml洗脱，收集洗脱夜，蒸干，残渣加水30 ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20 ml，合并正丁醇液，用水洗涤2次，每次20 ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5 ml使溶解，作为对照药材溶液用。
2.1.4 阴性液制备 按通阳活血颗粒处方去除黄芪,其他按供试品制备方法制成阴性液。
2.1.5 薄层层析 照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录V IB)试验,吸取上述四种溶液各10、 20 μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正丁醇-醋酸乙酯-甲醇-水(4∶1∶1∶1)为展开剂,展开,取出,晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃烘约5 min,至斑点显色清晰,取出。
2.1.6 测定结果 供试品色谱中,在与标准品、对照药材色谱相应的位置上，日光下显相同的棕褐色斑点，阴性液无干扰(见图1)。
2.2 红花薄层色谱鉴别［3-4］
2.2.1 供试品制备 取本品适量，加80%丙酮溶液20 ml，密塞，超声处理10 min，过滤，滤液作为供试品溶液。
2.2.2 对照药材溶液的制备 取红花适量，加水煎煮2次(1 h�，0.5 h)，每次20 ml,过滤，合并滤液，加乙醇使之含醇70%，放置6 h，过滤，滤液回收乙醇至干，残留物加20 ml水溶解后按供试品溶液制备项下方法制成红花对照药材溶液1 ml。
2.2.3 阴性对照品的制备 取不含红花的通阳活血颗粒适量，溶解，再按供试品溶液制备项下方法制成空白对照液1 ml。
2.2.4 薄层层析 照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录V IB)实验，吸取上述三种溶液各5 μl，分别点于同一以羧甲基纤维素为粘合剂的硅胶H薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇(7∶2∶3∶0.4)为展开剂，展开，取出，晾干。
2.2.5 测定结果 供试品色谱中与对照药材色谱相应位置上，日光下显相同红褐色的斑点，阴性液无干扰 (见图2)。
3 讨论
3.1 用TLC法鉴别通阳活血颗粒，均能检测到主药黄芪和红花的成分，色谱斑点清晰，附近无杂质斑点干扰，方法简便、快速、可行性及重现性好，结果准确、可靠，可用于该制剂质量控制中的定性分析。
3.2 本实验的关键是选择适宜的试验条件、合适的分离提纯方法及展开条件。在对黄芪中有效成份黄芪甲苷的提取中选取合适的提取溶剂，以获得纯的黄芪甲苷成份。在测定黄芪甲苷含量过程中发现展开剂的选择及配比对测定结果影响较大,传统的氯仿∶甲醇∶水(13∶7∶2)和正丁醇∶冰醋酸∶水(4∶1∶1)对于本制剂的分离效果都不理想,在多次比较筛选后本实验确定选用正丁醇∶醋酸乙酯∶甲醇∶水(4∶1∶1∶1)为展开剂。
3.3 通阳活血颗粒作为复方中药制剂，原质量标准只是对某一类物质进行理化鉴别，专属性不强，为了更准确地控制其质量标准，故在原质量标准基础上增加了对制剂中黄芪、红花的薄层色谱鉴别，为制定其质量标准提供理论依据，确保临床用药的安全和有效。
参考文献
［1］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典.化学出版社，2005：212-213.
［2］ 聂明华，黄淑君.中风康复胶囊中黄芪、红花、丹参的薄层色谱鉴别.中国药业出版社，2006,15(8):29.
［3］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典.化学出版社，2005：103-104.
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