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【摘要】 目的 优选复方三棱胶囊提取工艺的最佳条件,以保证临床用药的安全、有效。 方法 采用正交试验法优选了挥发油的提取,并利用B-环糊精包合技术达到了防止莪术油挥发,增大水溶性,提高生物利用度的目的,使复方三棱胶囊达到现代的制剂生产标准。结果 复方三棱胶囊的质量标准符合《中国药典》一部(2005年版)标准。结论 复方三棱胶囊处方合理、制备简单科学、提取工艺准确、使用安全可靠。
【关键词】复方三棱胶囊;提取工艺;正交试验
复方三棱胶囊来源于我院临床验方,由十多味中药组成,具有活血化瘀,清热解毒,通经达络,行气导滞、软坚散结之功效,主要用于治疗瘀血、炎症阻塞输卵管所致的不孕症,根据现代制药技术将该处方制备成胶囊,临床应用疗效确切,对输卵管粘连及阻塞的患者有显著疗效,同时也为临床提供了一个安全有效的治疗输卵管阻塞性不孕症的药物。
复方三棱胶囊在制备上,根据各药材所含有效成分的理化性质和在中药方中的作用,对有效成分提取分三部分进行:①挥发油的提取和β-环糊精包合;②醇溶性有效成分的提取;③水溶性有效成分的提取。在制备工艺研究中,针对方中君药莪术的有效成分,首先采用正交试验法优选了挥发油的提取,并利用β-环糊精包合技术达到了防止莪术挥发油挥发、增大水溶性、提高生物利用度的目的;在提取醇溶性有效成分的研究中,对影响提取效果较大的因素(乙醇浓度、溶媒用量、回流时间、回流次数)进行了考察,有效成分提取后,制成便于服用的胶囊剂。优选出最佳提取工艺。
1 资料与方法
1.1 一般资料 复方三棱胶囊处方 穿山甲10 g;皂刺10 g;三棱10 g;莪术10 g;路路通10 g;当归10 g;白芍10 g;香附10 g;青皮10 g;淫羊藿20 g;公英30 g;山药10 g;陈皮10 g;水蛭5 g;夏枯草30 g;红花10 g;柴胡10 g。
1.2 处方主要成份提取工艺优选 由于复方三棱胶囊中原料药材的有效成分主要为挥发油、醇溶性有效成分和水溶性有效成分,所以我们在主要成分的提取工艺方面分三部分进行。
1.2.1 莪术挥发油提取工艺优选 莪术为姜科植物,药用成份主要为莪术挥发油,其具有抗菌、消炎、增强免疫功能和抑制血栓形成的作用。根据文献报道和预试验结果,考察药材浸泡时间、粒度、加水量及提取时间等影响挥发油提取效果的4个因素,每个因素选取3个水平,试验方案见表1。
表1
因素水平表
水平因素
浸泡时间(h)�A粒度�B加水量�(药材倍数)C提取时间(h)�D
10饮片84
21.5粗颗粒(d:4~6 mm)105
33最粗粉126
取五倍处方量的莪术药材,即50.0 g,根据L�9(3�4)试验各条件,按挥发油提取法中水蒸汽蒸馏法进行提取,提取液冷却后,再用醋酸乙酯提取,加无水硫酸钠脱水,滤过,转移并定容至50 ml量瓶中,密闭保存。莪术挥发油含量测定的线性关系考察 精密称定莪术同0.8006 g,加醋酸乙酯稀释并定容至25 ml量瓶中,精密吸取20,40,60,80,100 μl,分别用醋酸乙酯定容到10 ml,紫外分光光度法在200~600 nm范围进行扫描,于253 nm波长处有最大吸收,测定吸收度,以莪术挥发油浓度为横坐标,以吸收度为纵坐标,进行线性回归,得回归方程:Y=3197.65x+0.2673,r=0.9996。结果表明,莪术挥发油在0.0640~0.0320 mg/ml浓度范围内,浓度与吸收度呈良好线性关系。
1.2.2 莪术油-β-环糊精包合工艺优选 由于莪术挥发油有挥发性强、不溶于水、生物利用度差、不易于口服的缺陷,所以在卵管通胶囊的制备工艺中,我们采用β-环糊精(β-CD)来制备莪术油-β-CD包合物,以此防止莪术油挥发,增强莪术油的稳定性,增大其水溶性,达到提高生物利用度的目的。根据初步实验结果,采用研磨法进行莪术挥发油包合优于饱和水溶液法,故采用研磨法。具体操作为:称取一定量的β-CD,加适量水研磨,再加入一定量以无水乙醇稀释的莪术挥发油,共同研磨数分钟,放置,晾干后,加适量醋酸乙酯洗涤包合物,包合物低温(40 ℃)烘干,放置备用。将包合物精密称重,计算得量及收率。将包合物加入20倍量水,按挥发油提取法进行提取,至油量不再增加。按标准曲线法进行测定,计算包合率。包合物收率=包合物得理(g)/[挥发油重(g)+β-CD重(g)]×100%;莪术油包合率=[包合后提取的挥发油量(g)/加入挥发油的总量(g)]×100%。采用正交试验设计法优选β-CD包合物的制备工艺:结合预试验,对影响包合效果较明显的因素,β-CD与油的投料配比、加水量、研磨时间、温度进行考察,每个因素选取3个水平。以收率和包合率数据中最大值作为10分,其他的数据进行相应的折算,因包合率为衡量包合效果的重要指标,包合率越高,包合效果越好,可作为包合工艺筛选的主要指标:收率在大生产中也很有意义,一般收率越高,包合效果越好,所以最终考察指标“得分”是两者分别乘以加权系数0.7和0.3的加权平均值。
1.3 乙醇提取工艺优化的研究 根据各药材有效成分的理化性质和药理研究资料,三棱总黄酮具有较强的抗血小板凝聚及抗血栓作用,三棱醋灸品乙醇提取物中总黄酮的含量最高;路路通的乙醇提取物具有消炎、消毒等作用;柴胡中的主要成分柴胡皂苷用乙醇提取效果较好;香附的醇提取物具有促进胆汁分泌、抗菌、抗炎的作用;青皮的醇提取物可以促进胆汁分泌,具有舒肝泄气的功能;当归醇提液具有养血调经的功效;白芍有抗炎、抗病毒、解痉、镇痛、护肝等多种药理活性,其中芍药苷是主要有效成份,醇提法对芍药苷的提取效果较好;醇提取的各药材,除含醇溶性有效成分外,还含有水溶性有效成分,所以对以上药材先采用乙醇提取法提取,然后将残渣加入到水提取药材的提取罐中,再进行水提取。
1.4 水提取工艺设计 据报道,穿山甲的水提取物具有明显抗凝血、抗炎作用;由于水蛭的水提取物有抗凝血作用,所以采用水蛭粉成粗粉后水提取;红花中的红化黄素是红花中提取出来的水溶性成分,具有改进局部组织的微循环、治疗皮下充血肿胀等药理作用。乙醇提取后的药材残渣中,还含有水溶性有效成份,与水提取的药材一起继续进行水提取。所以对上述药材选用水提取法,为了保证有效成分浸出完全,我们进行2次水提取。由于上述药材的水提液除含有效成分外,还含有树胶、黏液质、蛋白质、糊化淀粉等,加入一定量95%乙醇,使不溶于乙醇的成分沉淀析出,达到了对提取液精制的目的,既方便患者用药,又增加制剂的稳定性。复方三棱胶囊具有活血化瘀、清热解毒、软坚散结之功效,主治瘀血、炎症阻塞输卵管所致的不孕症,适用于输卵管粘连、阻塞性不孕证及相关病因引起的妇科炎症。复方三棱胶囊临床主要用于盆腔炎、输卵管炎及输卵管阻塞引起的不孕症的治疗。
2 讨论
现代医学对于该病的常规治疗效果均不理想,宫腔镜、腹腔镜治疗技术含量高、治疗费用较贵,不便于普及。本研究中的中药复方三棱胶囊具有价格便宜、使用方便、疗效确切等优点。经十余年的临床研究表明,中药复方三棱胶囊在治疗输卵管阻塞性不孕症等方面将得到广泛应用。
参 考 文 献
[1] 徐淑云.药理实验方法学.人民卫生出版社,2005:713-715.
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