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[摘要] 目的:探讨survivin靶向小分子干扰RNA(siRNA)对卵巢癌细胞侵袭的影响。方法:在survivin基因的编码区内根据干涉位点的设计原则,体外转录合成survivin siRNA,转染人卵巢上皮性癌细胞株SKOV3细胞,用Western blot方法鉴定干涉位点对survivin基因蛋白的干扰效果;细胞侵袭实验(transwell)检测细胞体外侵袭能力的变化。结果:survivin siRNA能有效抑制survivin蛋白的表达,siRNA组survivin蛋白的相对表达水平分别与空白对照组、非特异性组相比,差异均有统计学意义(P 1.5测定SKOV3细胞的侵袭能力
制备NIH3T3条件培养液;用Matrigel包被基底膜;接种、培养细胞;固定及染色;每个样本计数10个400倍视野取其均值。
1.6统计学方法
用SPSS 13.0统计学软件进行分析。计量资料统计结果以(x±s)表示,3组间比较采用单因素方差分析,以P0.05),见图1、2。
C:空白对照组;N:非特异性siRNA转染组;S:survivin-siRNA转染组
2.2 细胞侵袭实验
通过检查细胞穿过Matrigel的能力反映出该细胞的侵袭能力。空白对照组侵袭细胞的相对数目为16.63±1.28,非特异性survivin-siRNA转染组的相对数目为15.83±1.23,survivin-siRNA转染组侵袭细胞的相对数目为4.26±0.91,见图3。经F检验得出特异性survivin-siRNA转染组侵袭至滤膜下面的细胞数低于其他组,差异有统计学意义(P