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[摘要]目的:用HPLC法测定心舒宝胶囊中芍药苷的含量。方法:采用DiamonsilTM(钻石)C�18色谱柱(200mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(35:65)为流动相,检测波长为230nm。结果:芍药苷在0.154～1.232ug范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率为99.84%(n=5),RSD为0.86%。结论:该检测方法简便,准确,重现性好。可用于心舒宝胶囊中芍药苷的测定。
[关键词]心舒宝胶囊;芍药苷;HPLC
[中图分类号]R927.2
[文献标识码]B
[文章编号]1006-1959(2009)11-0228-01
心舒宝胶囊由丹参、白芍、刺五加、郁金、山楂五味组成,有活血化瘀,益气止痛的功效,用于冠心病,气虚血瘀引起的胸闷,心绞痛,以及高血压,高血脂,动脉硬化等。为加强产品质量的可控性,我们采用HPLC法测定制剂中芍药苷的含量,经方法学验证,此方法操作简便、灵敏度高、结果准确。
1 仪器与试药
岛津LC-10ATVP高效液相色谱仪,SPD-M10AVP检测器,CLASS-VP色谱工作站;芍药苷对照品,(中国药品生物制品检定所,批号:110742-200314,供含量测定用);心舒宝胶囊样品3批(自制,批号:20050503、20050504、20050505);甲醇为色谱纯,水为重蒸馏水,其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件:色谱柱:DiamonsilTM(钻石)C�18柱(200mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-水(35:65);流速:1ml•min-1;柱温:35℃;检测波长为230nm;进样量:10μL。
在此色谱条件下,色谱柱的理论塔板数按芍药苷计应大于3000,样品中芍药苷与相邻成分达到基线分离,且阴性对照无干扰。见图1。
2.2 溶液制备
2.2.1 对照品溶液的制备:精密称取经五氧化二磷干燥24h的芍药苷对照品适量,加甲醇溶解,制成每1ml含0.06mg的溶液,作为对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备:取本品内容物1g,精密称定,置回流瓶中,精密加入甲醇50ml,称定重量,回流提取60min,冷却至室温后,用甲醇补足减失的重量,滤过,精密吸取续滤液1ml,置10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,用0.45μm微孔滤膜滤过,即得。
2.3 线性关系的考察:精密称取芍药苷对照品15.40mg,置50ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释了刻度,摇匀,精密吸取2ml,置10ml量瓶中,加甲醇稀释刻度,得0.06160mg/ml的芍药苷对照品溶液,分别精密吸取芍药苷对照品溶液2.5μl、5μl、10μl、15μl、20μl,注入色谱仪,记录色谱图,测定峰面积积分值,并以峰面积积分值对进样量进行回归。
2.4 精密度试验:精密吸取对照品溶液10μl(浓度为0.06160mg/ml),重复进样5次,测定芍药苷峰面积积分值,求出相对标准偏差,结果表明精密度良好,RSD=0.33%。
2.5 稳定性试验:取同一供试品溶液,在室温下不同时间(0,2,4,8,12h)进样10μL,测定芍药苷峰面积值,求相对标准偏差,结果表明,芍药苷在12h内基本稳定(RSD=1.0%)。
2.6 重复性试验“精密取本品内容物各1g,共5份,照前述供试品溶液的制备方法制备成供试品溶液。
2.7 加样回收率试验采用加样回收法试验,取已知含量的同一批样品(批号:20040101,芍药苷含量为19.12mg/g)5份,精密称取各约0.5g,精密加入芍药苷对照品适量,按供试品溶液制备方法制备成供试品溶液,精密吸取供试品溶液各10μl,照上述色谱条件测定,照前述色谱条件测定,结果平均回收率为99.84%,RSD为0.86%。
2.8 样品测定:取3批样品,按前述方法制成供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10uL,按前述色谱条件测定,3批样品含量分别为每粒9.64、9.30、9.74mg(每粒装0.5g)。
3 讨论
在试验过程中,对同一批样品处理方法中分别对,不同提取方法(回流提取、超声提取、索氏提取),提取溶剂(水、甲醇、乙醇),提取时间(15、30、60、90min)考察,结果经过条件优选,最终选择精密加入甲醇50ml,称定重量,回流提取60min为提取条件。
