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[摘要] 目的：建立盐酸氟桂利嗪口腔崩解片的HPLC含量测定方法。方法：采用shimadzu ODS C18色谱柱（150.0 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇-磷酸二氢钾（0.01 mol/L，pH=3.5）（68∶32）；流速为1.0 ml/min ；检测波长为254 nm；柱温：30℃。结果：盐酸氟桂利嗪浓度为4.8～57.6 μg/ml线性关系良好（r=0.999 9）；平均回收率为100.27%，RSD为1.00%（n=9）。结论：本方法简便、灵敏，精密度高，重现性好，可用于盐酸氟桂利嗪口腔崩解片的含量测定。
[关键词] 盐酸氟桂利嗪；口腔崩解片；高效液相色谱法；含量测定
[中图分类号] R286.0[文献标识码]A [文章编号]1674-4721（2011）04（b）-0０5－０2
HPLC Determination of Flunarizine Hydrochloride Orally Disintegrating Tablets
WANG Jingxiang1,2, MU Vei1, CAO Deying2, TANG Xuting1
1.College of Chemical Engineering, Shijiazhuang University, Hebei Province, Shijiazhuang 050035, China; 2.College of Pharmaceutical Sciences, Hebei Medical University, Hebei Province, Shijiazhuang 050017, China
[Abstract] Objective: To establish HPLC determination method of Flunarizine Hydrochloride orally disintegrating tablets. Methods: HPLC analysis was carried out by using shimadzu ODS C18 column(150.0 mm×4.6 mm, 5 μm). Mobile phase was methanol-potassium dihydrogen phosphate (0.01 mol/L, pH=3.5)(68∶32); The flow rate was 1.0 ml/min. The detection wavelength was set at 254 nm and the column temperature was 30℃. Results: There was a good linear relationship for flunarizine hydrochloride in the range of 4.8－57.6 μg/ml(r=0.999 9). The average recovery was 100.27% （n=9） and RSD was 1.00%. Conclusion: This method is simple, sensitive, and accurate with good reproducibility. It can be used for the content determination for Flunarizine Hydrochloride orally disintegrating tablets.
[Key words] Flunarizine Hydrochloride; Oral disintegrating tablets; HPLC;Content determination
盐酸氟桂利嗪口腔崩解片的主要成分为盐酸氟桂利嗪，是一种选择性的钙通道阻断剂，临床常用于脑血栓形成、脑栓塞、脑动脉硬化、脑出血恢复期、脑外伤后遗症、内耳眩晕症、冠状动脉硬化等疾病的预防和治疗[1-3]。文献报道有原料药及胶囊剂和片剂的含量测定方法，包括电位滴定法、紫外分光光度法和高效液相色谱法[4-6]，而口腔崩解片的含量测定方法未见文献报道，因此，本文探索了HPLC法测定实验室制备的该制剂的含量，方法可靠，结果准确。
1 仪器与试药
1.1 仪器
FA-2104B电子天平（上海精密科学仪器有限公司），UV-6100S紫外分光光度计（上海普美达仪器有限公司），岛津SPD-10A高压液相色谱仪（日本岛津株式会社）；N2010工作站（浙江大学）。
1.2 试药
盐酸氟桂利嗪对照品（石家庄华新制药厂，批号：070216，含量99.62%），盐酸氟桂利嗪口腔崩解片（实验室制备，规格5 mg），甲醇为色谱纯，其他试剂为分析纯，水为高纯水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：shimadzu ODS C18柱（150.0 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇-磷酸二氢钾（0.01 mol/L，pH=3.5）（68∶32）；流速：1.0 ml/min；检测波长：254 nm；柱温：30℃；进样量：20 μl。
2.2 溶液的配制
2.2.1 对照品溶液配制精密称取于105℃干燥至恒重的盐酸氟桂利嗪对照品60 mg，置于50 ml容量瓶中，加入乙醇10 ml溶解后，加盐酸溶液（稀盐酸24 ml加水至1 000 ml）稀释至刻度，摇匀，得对照品储备液；精密吸取储备液1 ml，置于100 ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得浓度为12 μg/ml对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液配制取盐酸氟桂利嗪口腔崩解片20片，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于盐酸氟桂利嗪12 mg）置100 ml容量瓶中，加乙醇10 ml溶解后加盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm滤膜滤过，再精密量取续滤液5 ml，置50 ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得供试品溶液。
2.3 方法学考察
2.3.1 线性关系考察精密吸取对照品储备液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 ml分别置于25 ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀；依“2.1”项下色谱条件，各取20 μl进样；以峰面积（A）和浓度（C）进行回归分析，得回归方程A=31 250.67C-1 547.37，相关系数为r=0.999 9；表明盐酸氟栓利嗉浓度为4.8～57.6 μg/ml呈线性关系。
2.3.2 空白试验另取按处方量配制的空白辅料适量[7-8]，照“2.2.2”项配制成空白溶液，进样测定，结果在对照品主吸收峰处无干扰；取供试品溶液同法测定，主吸收峰保留时间与对照品一致，无杂峰，记录色谱图，盐酸氟桂利嗪HPLC色谱图（HPLC chromatogram of Flunarizine Hydrochloride）见图1、2、3。
2.3.3 精密度试验取“2.5.1”项下高、中、低（38.40、28.80、19.23 μg/ml 3个浓度的溶液，在1 d内不同时间测定5次，计算日内精密度分别为0.85%、0.93%、1.06%；每天测定1次，连续测定5 d，计算日间精密度分别为1.21%、1.35%、1.59%。结果表明，方法精密度较好。
2.3.4 重现性试验精密称取同一批盐酸氟桂利嗪口腔崩解片样品约0.24 g，共6份，照“2.2.2”项分别配制供试品溶液，测定峰面积，计算盐酸氟桂利嗪平均含量为49.48 mg/g，RSD为0.59%。
2.3.5 稳定性试验取同一批样品，按“2.2.2”项下配制供试品溶液，置室温自然放置，分别于0、1、2、4、8、12、24 h取样测定，考察其稳定性，盐酸氟桂利嗪的平均峰面积为2.596×106，RSD为0.92%。
2.3.6 回收率试验精密称取盐酸氟桂利嗪对照品约4、5、6 mg各3份，按处方量加入相应的辅料，分别按“2.2.2”项下配制高、中、低3个浓度的溶液，分别测定，计算回收率分别为99.26%、100.28%、101.27%，RSD分别为0.97%、1.26%、1.49%。其平均回收率为100.27%，RSD为1.00%（n=9）。
2.3.7 灵敏度试验精密吸取对照品溶液1 ml，置于25 ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，取适量注入高效液相色谱仪，调节进样量。结果表明：当进样量为2.6 μl时，信噪比（S/N）=3.1，确定最低检测限为1.25 ng，当进样量为11.2 μl时，S/N=10.5，确定最低定量限为5.38 ng。
2.4 样品测定
取样品3批，分别按“2.2.2”项下配制供试品溶液，精密吸取20 μl注入高压液相色谱仪，记录峰面积；另取对照品溶液同法测定，按外标法以峰面积计算盐酸氟桂利嗪的含量。结果见表1。
3 讨论
3.1 检测波长的选择
取照品溶液，在200～400 nm范围内进行扫描；另取空白溶液，同法测定，盐酸氟桂利嗪在253.6 nm处有最大吸收，辅料的吸收度仅为0.002 9，干扰较小，故检测波长选择为254 nm。
3.2 流动相的选择
调整流动相组分甲醇和磷酸盐缓冲溶液的比例，当甲醇-磷酸二氢钾（0.01 mol/L，pH=3.5）（68∶32）时，色谱峰峰形最好，不拖尾，保留时间适当，与杂质峰的分离度高；同时进行了甲醇、甲醇-乙腈等为流动相时的试验，结果均不理想。
3.3 样品的处理与测定
用0.45 μm滤膜过滤，除去难溶性颗粒杂质，可避免引起色谱柱的堵塞；辅料中可溶性杂质对测定无影响。
[参考文献]
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（收稿日期：2011-01-26）
