【www.zhangdahai.com--爱国演讲稿】
【摘要】 目的 建立紫外分光光度法测定山楂西洋参疏肝口崩片中山楂总黄酮的含量。方法 以芦丁为对照品，以亚硝酸钠、硝酸铝及氢氧化钠为显色剂，测定波长为500 nm。结果 在0．014 06~0．070 3 mg/ml范围内芦丁的吸收度和浓度线性关系良好(r=0．999 9)，平均回收率为99．43%，(RSD2-AlNO�3-NaOH as chromogenic agent，with the wave length set at 500 nm.Results The absorbency and concentration of rutin have good linear in the range of 0．014 06-0．070 3 mg/ml(r=0．999 9).The average recovery was 99．43%，(RSD[1]。
1 仪器与试药�
UV-1601紫外-可见分光光度计(日本岛津公司)，AEG-45SM电子天平(十万分之一，日本岛津公司)，山楂西洋参疏肝口崩片(自制)，芦丁(中国药品生物制品检定所，批号：100080-200306，供含量测定用，含量按91．7%计)，所用试剂均为分析纯〔重庆川东化工(集团)有限公司化学试剂厂〕。
2 实验方法及结果
2．1 对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品7．67 mg，含芦丁7．03 mg，置10 ml量瓶中，加甲醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，即得(每毫升中含无水芦丁0．703 mg)。
2．2 供试品溶液的制备 取本品10片，研细，取0．25 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 ml，称定重量，密封，超声处理(功率220 W，频率50 kHz)15 min，放冷，称定重量，补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2．3 阴性样品的制备 取缺山楂总黄酮的山楂西洋参疏肝口崩片10片，按供试品溶液制备方法依法制备，得山楂西洋参疏肝口崩片阴性样品溶液(即仅含西洋参总皂苷)。
2．4 最大吸收波长的选择 分别精密吸取对照品、供试品溶液及阴性样品溶液各1 ml于25 ml容量瓶中，加5%NaNO2 1 ml，混匀，放置6 min，加10%Al(NO�3)�3 1 ml，摇匀，放置6 min，加NaOH试液10 ml，加甲醇至刻度，摇匀放置15 min后，以相应试剂作空白，照紫外-可见分光光度法[2]，在400~800 nm范围进行光谱扫描，考察其最大吸收波长。结果显示供试品溶液、对照品溶液在500 nm均有最大吸收，故确定500 nm为测定波长。另取阴性样品溶液进行全波长扫描，结果阴性溶液在500 nm波长处无吸光度，证明阴性对样品中总黄酮的测定无干扰，见图1。�
2．5 标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液(0．703 mg/ml)0．5、1、1．5、2、2．5 ml，分别置25 ml量瓶中，加甲醇至2．5 ml，再分别加入5%NaNO2 1 ml，混匀，放置6 min， 加10%Al(NO�3)�3 1 ml，摇匀，放置6 min，加NaOH试液10 ml，加甲醇至刻度，摇匀，放置15 min后，照紫外-可见分光光度法，于500 nm波长下测定吸光度，以吸收度(A)为纵坐标，以浓度(X)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：A=12．404 X-0．026(r=0．999 9，n=5)。结果表明，芦丁的浓度在0．014 06~0．070 3 mg/ml范围内线性关系良好。
2．6 精密度试验 精密吸取芦丁对照品溶液(0．703 mg/ml)1 ml，按2．4项下方法同法操作，连续重复测定6次，RSD=0．26%(n=6)。结果表明，仪器具有较高的精密度。
2．7 重现性试验 按拟定的含量测定方法，取同一批号样品(060901)6份，每份约0．25 g，精密称定，按供试品溶液制备项下进行操作，依法测定，考察该方法的重现性，计算得平均含量为131．68 mg/g，RSD为0．29%(n=6)。结果表明，该含量测定方法具有较好的重现性。
2．8 稳定性试验 取供试品溶液及对照品溶液适量，按2．4项下方法同法操作，显色后分别于0、2、4、6、12 h于500 nm波长下测定吸光度。结果表明,对照品溶液及供试品溶液在显色操作完成后12 h内稳定，其RSD分别为1．10%和0．18%。
2．9 回收率试验 精密称取已知含量的本品(060901)9份，每份约0．05 g，精密称定，分别按样品中总黄酮含量的80%、100%和120%精密加入对照品，每个梯度3份。拟定的供试品溶液制备方法制备样品，测定含量，计算回收率，结果，平均回收率为99．43%，RSD
