【www.zhangdahai.com--实习报告】
[摘要] 目的 了解本地区2007～2008年念珠菌感染的菌种分布和耐药性情况,为临床抗真菌治疗提供依据。方法 收集本地区两家医疗机构两年间临床分离的念珠菌1462株,采用生物梅里埃ATB ID32C试条进行念珠菌菌种的分离鉴定,药敏试验采用生物梅里埃ATB-FUNGU30试条对氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、5-氟胞嘧啶和两性霉素B等5种抗真菌药物进行测定。结果 1462株念珠菌中以白色念珠菌为主,检出682株(59.6%),其他依次为热带念珠菌278株(21.3%),光滑念珠菌135株(9.2%),近平滑念珠菌70株(4.8%),克柔念珠菌27株(1.8%),其他念珠菌46株(3.1%)。念珠菌对伊曲康唑、氟康唑、5-氟胞嘧啶、两性霉素B和伏立康唑的耐药率分别为28.9%、10.6%、3.1%、1.5%和0。结论 本地区念珠菌感染以白念珠菌为主,对伊曲康唑和氟康唑耐药性较高,对5-氟胞嘧啶、两性霉素B和伏立康唑敏感性较高。本地区应建立真菌常规菌种鉴定及药敏试验,指导临床合理用药。
[关键词] 念珠菌; 耐药性; 抗真菌药
[中图分类号] R379.4 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2010)01-03-03
Candida Species Distribution and Resistance to Antifungal Agents
LIN Chaoping1 CUI Donglan1 XIE Meihong2
1.Department of Laboratory,the First People’s Hospital of Foshan City,Foshan 528000,China;2.Department of Laboratory,Yong’an Hospital of Foshan City,Foshan 528000,China
[Abstract] ObjectiveTo investigate the candida species distribution and susceptibility of Candida species to antifungal agents in Foshan city during 2007 to 2008,and provide evidence for diagnosis and treatment of fungi infection. MethodsIn a 2-year surveillance programme,1462 Candida stains were collected from two local medical institutions,Candida strains were identified by bioMérieux ATB ID32C test paper. Antifungal susceptibility of fluconazol,itraconazole,voriconazole,5-flurocytosine and amphotericin B was assessed by bioMérieux ATB-FUNGU30 test paper method. Results Among 1462 strains examined,Candida albicans accounted mainly for 59.6%(682 strains),and the other species accounted for 31.3% including,tropicalis 21.3%(278 strains),Candida glabrata 9.2%(135 strains),Candida parapsilosi 4.8%(70 strains),Candida krusei and 1.8%(27 strains)and the other Candida 3.1%(46 strains). The resistant rates to itraconazole,fluconazol,5-flurocytosine,amphotericin B and voriconazole were 28.9%,10.6%,3.1%,1.5% and 0,respectively. ConclusionThe pathogens causing fungus infection are mainly C. albicans in Foshan city,and it shows more sensitive to 5-flurocytosine,amphotericin B and voriconazole compared with itraconazole and fluconazol. The Fungi and Fungal pathogens routine strain identification and susceptibility test in this region should be established,guiding clinical rational drug use.
[Key words]Candida; Resistance; Antifungal agents
近年来,大量广谱抗生素、激素、免疫抑制剂的应用及各种介入性治疗技术的开展,尤其是随经济社会发展,越来越多医院投入使用密闭式中央空调,使真菌成为院内感染的一大病原菌,种类不多的抗真菌药反复使用后诱发越来越严重的耐药现象。控制真菌感染及耐药现象任务艰巨,真菌病原菌分布及耐药性监测意义具有举足轻重的作用。本研究收集本地区数家医疗机构2007～2008年临床分离的念珠菌1462株,统一进行菌株鉴定及药敏试验。分析念珠菌分布情况及监测耐药性的动态变化,提供临床合理用药的依据。
1 材料与方法
1.1 实验菌株及质控株
实验菌株:收集2007年6月～2008年12月本地区两家医疗机构门诊和住院病人临床标本分离的阳性菌株1462株,标本来自痰、分泌物、尿、大便等,见表1。
实验质控株:ATCC90029白色念珠菌(NCCLS M44-P推荐的标准株),ATCC10231白色念珠菌(丹麦ROSCO公司推荐)。
1.2 培养基
1.2.1 分离培养基 麦康凯、血平板、沙保罗培养基(自制),沙保罗培养基干粉来源于杭州六和生物公司。
1.2.2 鉴定培养基 真菌鉴定条ATB ID32C来源于法国梅里埃。
1.2.3 药敏培养基 ATB-FUNGNS3试条,来源于法国梅里埃。
1.3 方法
1.3.1 念珠菌的分离培养 标本接种麦康凯、血平板、沙保罗培养基,28～35℃,5% CO2培养18～48h,挑取可疑菌落做革兰染色,初步鉴定为酵母样真菌后转种。
1.3.2 念珠菌的鉴定 按说明书操作规程进行,梅里埃ATB ID32C真菌鉴定条鉴定至种,必要时增加手工试验。
1.3.3 药敏试验 采用梅里埃ATB-FUNGNS3试条对氟康唑(FCZ)、伏立康唑(VCZ)、伊曲康唑(ITC)、5-氟胞嘧啶(5-FC)和两性霉素B(AMB)进行测定,按相应的标准判断敏感性,并用实验质控标准株作质控。
2 结果
2.1 菌种分布情况
从2007年6月～2008年12月共分离收集到念珠菌1462株,菌种构成比以白色念珠菌为最高,占59.6%(871/1462),其次是热带念珠菌占21.3%,光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌,这3种念珠菌占总检出率的15.7%。见表1。
2.2 念珠菌对抗真菌药物的敏感性
伊曲康唑的耐药率最高达到28.9%,其次为氟康唑,其耐药率为10.6%,5-氟胞嘧啶和两性霉素B的耐药最低只有1.8%和1.5%,伏立康唑未见耐药菌株。在菌种耐药性分布中,热带念珠菌对伊曲康唑和氟康唑耐药率最高,分别达到39.4%和15.7%,近平滑念珠菌对两性霉素中敏率达到51.4%,而白色念珠菌出现多重耐药情况,有58株(6.7%)白色念珠菌同时耐氟康唑和伊曲康唑。详见表2。
3 讨论
从本地区2007～2008年两家医疗机构临床标本分离的念珠菌菌种分布来看,白色念珠菌仍然是本地区主要酵母样真菌感染的病原菌,占所有酵母样真菌感染构成比的59.6%,与国内外有关文献报道一致[1],热带念珠菌和光滑念珠菌分别占21.3%和9.3%,因此构成了本地区酵母样真菌感染菌种分布的特点。在标本来源中痰标本分离的酵母样真菌最多有682株,占分离株的46.8%,痰标本主要以呼吸科和ICU(重症监护病房)以及脑外科病人为主,这些病人多数是老年人和危重病人,反复使用广谱抗生素或使用导管、插管等侵入性治疗,导致抗真菌能力降低,机体抵抗力弱,容易引起院内感染,其次是各种分泌物(主要是阴道分泌物278株,19.0%)和尿液标本(261株,17.8%),与文献报道相同[1,2],提示本地区泌尿生殖道感染与念珠菌感染有关联。
由于临床真菌感染治疗疗程长,以及抗真菌药的不合理和不规则应用,给临床真菌感染的治疗带来难度,耐药菌株也随之大量出现[1]。
通过本地区两年间收集的1462株念珠菌临床分离株对抗真菌药物敏感性监测结果表明,伊曲康唑的耐药率最高(28.9%),其次为氟康唑(10.6%),5-氟胞嘧啶和两性霉素B这两种抗真菌药耐药性较低,伏立康唑暂未发现耐药菌株。伏立康唑一种较新的三唑类药,其主要作用机制与咪唑类药物相似,既抑制细胞色素P450依赖性的14-α脱甲基酶的功能,又对耐氟康唑的菌株如克柔念珠菌也有很大的杀伤力[3],而对肝、肾、肺、心脏的副作用明显少于5-氟胞嘧啶和两性霉素B,是一个临床潜能较大的药物。
监测结果显示伏立康唑在本地区对大多数耐药株仍有较好的治疗作用,尤其对耐氟康唑和伊曲康唑的克柔念珠菌有较好的抑菌作用,与有关报道相符[3]。另外从表2药敏结果显示,在菌种耐药性分布中,热带念珠菌对伊曲康唑和氟康唑耐药率最高,分别达到39.4%和15.7%,近平滑念珠菌对两性霉素中敏率达到51.4%,虽然白色念珠菌对5-氟胞嘧啶和两性霉素B仍有较高的敏感性,但是出现了多重耐药情况,有58株(6.7%)白色念珠菌同时耐氟康唑和伊曲康唑。以上数据同有关文献报道不尽相同[6],可能与各地区易感菌株分布不同有关,因此,应加强真菌耐药性监测,指导临床合理用药。
[参考文献]
[1] 刘华,周中华,喻华,等. 260株念珠菌分离鉴定及耐药性分析[J]. 中华医院感染学杂志,2004,14(3):347-349.
[2] 张建平,张春盛,辛德清,等. 酵母样真菌的病原分布与耐药性监测[J]. 中国感染控制杂志,2005,4(1):61-63.
[3] Shunji Takakura,Naoko Fujihara,Takashi Saito,et al. National surveillance of species distribution in blood isolates of Candida species in Japan and their susceptibility to six antifungal agents including voriconazole and micafungin[J]. Journal of Antimicrobial Chemotherapy,2004,53:283- 289.
[4] 张慧莲. 酵母样真菌分离及耐药性分析[J]. 实用全科医学,2005,3(3):270.
[5] Homayoon Sanati,Paul Belanger,Rutilio Fratti,et al. A new triazole,Voriconazole(UK-109,496),blocks sterol biosynthesis in Candida albicans and Candida krudei[J]. Antimicrob Agents Chemother,1997,41(11):2496-61.
[6] 任南,文细毛,徐秀华,等. 全国医院感染监控网院内真菌感染监测及临床意义[J]. 中华医院感染学杂志,2004,14(6):549.
(收稿日期:2009-08-17)
