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[摘要] 目的 评价我科Sysmex XE-5000与XS-800i血细胞分析仪对红细胞碎片干扰血小板（PLT）检测结果的性能。方法 分别用XE-5000电阻抗法（PLT-I）、XE-5000荧光法（PLT-O）、XS-800i电阻抗法检测经红细胞碎片干扰后的标本，运用SPSS12.0进行数据回归分析和配对t检验。结果 正常对照组的样本用三种方法检测，结果重复性好，差异不具有统计学意义（P＞0.05）。在高浓度组中三种方法的检测结果都与对照组有明显的差异（P＜0.01）；而在低浓度组PLT-O法显示了其良好的抗红细胞碎片干扰性，即干扰前后结果不具有统计学差异（P＞0.05）。结论 对于受红细胞碎片干扰的血小板检测，XS-800i电阻抗法抗干扰能力与XE-5000 PLT-I法一般，但XE-5000开通荧光通道后，其PLT-O检测结果优于前两者。
[关键词] XE-5000；XS-800i；血小板计数；红细胞碎片干扰试验
[中图分类号] R446 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2011）32-79-03
Evaluation of Platelet Count in RBC Fragment Interference Experiment on SYSMEX XE-5000 and XS-800i Hemacytology Analyzer
LIU Wen ZHENG Xin LIU Xiaomin
Department of Clinical Laboratory，Cancer Center of Sun Yat-sen University，Guangzhou 510060，China
[Abstract] Objective To evaluate the ability of PLT counting anti-interference in RBC fragment interference experiment on SYSMEX XE-5000 and XS-800i hemacytology analyzer in laboratory. Methods Counting PLT in RBC fragment interference experiment with XE-5000 electric impedance（PLT-I），XE-5000 optical（PLT-O）and XS-800i electric impedance methods. Compare and analyze the data according to SPSS12.0. Results There were significant correlations（P＞0.05）and good repeatability in the results among three methods in normal PLT. In High concentrations group，the result of the methods and control group were statistically significant（P＜0.01）.But in low concentrations group，PLT-O shows its excellent ability of anti-interference in RBC fragment experiment. Conclusion For counting PLT with RBC fragment interference，XS-800i electric impedance has common ability to anti-interference the same as XE-5000 PLT-I. The result also showed that the XE-5000 PLT-O method is better than XE-5000 PLT-I and XS-800i electric impedance for anti-interference in RBC fragment interference.
[Key words] XE-5000；XS-800i；PLT counting；RBC fragment interference experiment
血小板的主要功能之一是促进止血和加速凝血，同时血小板还有维护毛细血管壁完整性的功能[1]。血小板在止血和凝血过程中，具有形成血栓、堵塞创口、释放与凝血有关的各种因子等功能[2]。而恶性实体肿瘤中血小板增多可能导致凝血异常，如血栓形成和出血倾向，血小板对肿瘤的疾病进展和转移方面起着重要作用，因而血小板检测结果往往对临床医生起到重要的提示作用。而肿瘤患者经药物治疗后，血细胞形态常会出现改变，少量红细胞会出现破碎现象，导致对血小板检测的干扰。目前，血细胞分析仪对血小板检测的方法主要有两种，即电阻抗法（PLT�I）和荧光法（PLT�O）[3]。采用传统电阻抗法对血小板计数具有快速、精密度高、重复性好等优点；但易受红细胞碎片、细菌等“非血小板颗粒”的干扰，容易造成血小板数目的假性增高。因而在血常规检测中判定红细胞碎片干扰血小板的有无并作出排除，是决定血小板检测准确性的重要因素。日本希森美康公司XE5000血球分析仪具备PLT-I、PLT-O两种方法，而美国贝克曼LH750则采用传统电阻抗方法，但其对标本重复测定三次，精密度较高。本实验在于比较两台血球分析仪对血小板检测的抗干扰能力。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
1.1.1 仪器 日本SYSMEX公司提供的XE-5000（序列号为A1636）与XS-800i（序列号为63437）全自动血细胞分析仪，两机共用相同校准液与质控品（使用前已进行原厂校准及质控，校准品批号为03200525，质控品批号为QC-10300810、QC-10300811、QC-10300812，结果均在控）。两台仪器经过专用校正物进行校正，日常保养正常，每个工作日均用原厂高、中、低三个水平的质控物做2次质控（上、下午各1次），两机每个月做一次比对试验，结果均较好[4]。仪器的工作状态正常。
1.1.2 试剂 XE-5000与XS-800i均使用原厂试剂及质控品。
1.1.3 EDTA-K2 2mL真空采血管，由阳普公司生产。
1.1.4 标本来源 随机抽取2011年5月本院的住院和门诊患者或健康体检者。标本120例（要求标本达2mL），年龄范围3～80岁。标本置室温下2h内完成检测。
1.2 方法
1.2.1 标本制备 查标本相关历史记录，将ABO血型系统与RH血型相同的三支标本混为一支混合全血，共获得40份混合全血，每份混合全血体积达6mL。
1.2.2 红细胞碎片干扰试验[5] 将1份混合血样分装4管（每管800μL），将第1管高速3600r/min离心5min后取压积红细胞层200μL，加入蒸馏水摇匀后高速3600r/min 离心5min，留取RBC碎片层，用生理盐水反复洗3次后稀释至200μL，取上述RBC碎片悬液80μL加入第2管血样中（高碎片浓度干扰组），再将剩下的RBC碎片悬液120μL加生理盐水稀释至2mL，取上述RBC碎片悬液80μL加入第3管血样中（低碎片浓度干扰组）。第4管血样作为阴性对照组加80μL生理盐水。用XS-800i上机，XE�5000的PLT�I和PLT�O的手动进样法对上述第2、3、4管进行检测，以第2、3管PLT测定值与第4管测定值进行配对t检验（n＝20）。
2 结果
2.1 XS-800i组、XE-5000 PLT-I组与XE-5000 PLT-O组的对照组两两比较
XS-800i组、XE-5000 PLT-I组与XE-5000 PLT-O组的对照组两两作回归分析及配对t检验，结果它们两两之间均无统计学差异（P＞0.05），相关性良好（图1、2、3及表1），反映这两台仪器、三种方法的重复性良好，利于试验。
由表1可知，三组对照组之间的P＞0.05，即三组对照组之间没有统计学差异，显示了这两台仪器三种方法在没有干扰的情况下重复性良好。
2.2 红细胞碎片对血小板干扰试验
由上得共40组高浓度与低浓度红细胞碎片对血小板干扰试验，共作40组高浓度与低浓度红细胞碎片干扰试验，结果以XE-5000（PLT�I）、XE-5000（PLT�O）及XS-800i分别与自身对照组两两作配对t检验。其结果由表2可见，高浓度组XE-5000 PLT-I：t=13.8144，P＜0.01；XE-5000 PLT-O：t=43.277608，P＜0.01；XS-800i：t=16.21307，P＜0.01。提示在高浓度红细胞碎片的干扰下，两种仪器、三种方法的测定结果与对照组之间差异有统计学意义，即高浓度的红细胞碎片对这两种仪器、三种方法都有影响。低浓度组XE-5000 PLT-I：t=10.9025，P＜0.01；XE-5000 PLT-O：t=0.6407233，P＞0.05；XS-800i：t=16.21307，P＜0.01。显示在低浓度红细胞碎片的干扰下，XS-800i、XE-5000 PLT-I与对照组之间的差异也有统计学意义，而PLT-O表现出抗红细胞碎片干扰的能力较强。
3 讨论
现今的血液分析中，血小板检测作为继白细胞后最有力的诊断依据，其对血液疾病、肿瘤、感染、缺氧、创伤、骨折等，给临床医生都有明显的提示作用[2]。但其由于体积过小及易受干扰（如小红细胞、红细胞碎片、血小板聚集等），计数往往不能精确反映实际数量。因而，精确的血小板计数方法一直为检验界所不断追求的目标。目前计数血小板的方法主要有三类：①目视法：采用草酸铵溶液作溶血稀释液，在相差显微镜下计数血小板。该方法容易受到充池、血小板在计数板上的分布、技师的主观判断等误差因素影响[1，5]，重复性较差且费时，已不适用于临床工作的需求，但因为是直接计数，仍作为世界卫生组织（WHO）推荐的参考方法。②流式细胞仪法：用荧光标记的血小板抗体标记血小板，通过流式细胞仪检测荧光计数，但该方法麻烦且昂贵、仪器需求高、操作复杂、成本高，因此难以在临床上推广使用[6，7]。③传统血细胞分析仪法：因其具有稳定性好、重复性好、精密度高、计数准确、测定速度快等优点，已广泛应用于临床。但传统的电阻抗法不能将血小板与NPPs如小红细胞、红细胞碎片、白细胞碎片、细菌和真菌以及免疫复合物区分开来，造成计数不准。电阻抗计数技术已基本覆盖了所有型号的不同仪器，即利用细胞通过小孔时产生电阻的变化，测定其体积及数量[8]。SYSMEX系列的血细胞分析仪（如XS-800i、XS-1000i等）测定血小板也具备此方法。但其最新的XE-5000及XE�2100系列血细胞分析仪采用电阻抗和核酸荧光染色两种方法同时检测血小板，当中核酸荧光染色法通过对血小板中DNA与RNA的染色，继而采用半导体激光进行检测，此时若血样中存在小红细胞、红细胞碎片等情况时，PLT�O能对PLT作更精准的检测。本次试验则着重比较传统电阻抗法与荧光染色方法对不同浓度红细胞碎片干扰下血小板检测的抗干扰能力[9]。根据本实验表明：首先，正常样本在PLT-I和PLT-O与800i的测量结果都非常接近，重复性良好，差异都不具有统计学意义（P＞0.05）。在高浓度组中无论是PLT-I和PLT-O及800i的结果都不可信，它们的结果都与对照组有着明显的差异（P＜0.01）。而在低浓度组PLT-O显示了良好的抗红细胞碎片干扰性（P＞0.05）。
对于受红细胞碎片干扰的血小板检测，XS-800i电阻抗法抗干扰能力与XE-5000 PLT-I法一般，但XE-5000开通荧光通道后，其PLT-O检测血小板的结果优于前两者，一般临床常见的溶血均不影响其血小板的测定，只有高浓度的溶血情况下（临床罕见）其PLT-O法检测血小板的结果才不可信[10]。不同检验科应考虑各自成本、经济等因素，采取不同检测仪器及方法。
[参考文献]
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（收稿日期：2011-08-30）
