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【摘要】目的:探讨嘛呢止痛搽剂治疗颈肩腰腿痛的可能机理。方法:1.抗炎作用:对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀的影响,取小鼠60只,随机分为6组,分别用相应药物干预,观察耳重量之差;对甲醛所致大鼠足跖肿胀的影响,取大鼠60只,随机分为6组,在鼠右后踝骨给相应药3天。甲醛致炎,测定右后足体积值。2.活血作用:取家兔心脏血,分离血小板,分别加入相同体积的药物,测定由ADP和胶原蛋白诱导的血小板聚集率。结果:嘛呢止痛搽剂对小鼠急性渗出性炎症、毛细血管通透性、慢性炎症、ADP和胶原蛋白诱导的血小板聚集均有明显的抑制作用。结论:嘛呢止痛搽剂具有抑制炎症反应和血小板的聚集,改善局部血液循环的作用。
【关键词】嘛呢止痛搽剂;抗炎活血;实验研究
doi:10.3969/j.issn.1006-1959.2010.05.059 文章编号:1006-1959(2010)-05-1091-02
嘛呢止痛搽剂是在藏区治疗腰腿痛药物嘛呢骨痹液的基础上进行改进后制成的外用搽剂,经临床观察该药对颈肩腰腿痛有较好的疗效。为了探讨其药效学机理,在完成了该药镇痛作用试验研究后,我们又进行了该药抗炎及活血作用研究,具体如下:
1.抗炎作用研究
1.1 材料。
1.1.1 药物及试剂。嘛呢止痛搽剂:250ml/瓶,含生药量为0.084g/ml,由甘肃省中医药研究院提供。高粱酒:成都大邑荣丰酒厂生产。骨友灵搽剂:辽宁花源本溪药业有限公司生产。
1.1.2 动物。昆明种小鼠,体重18～22g,合格证号:第14-006号;Wistar大鼠,体重160～240g,合格证号:第14-005号。均由兰州医学院实验动物中心提供。
1.1.3 仪器。GJ-8402型热板测痛仪、721型分光光度计、FA1604s电子天平。
1.2 方法与结果。
1.2.1 抗炎作用。
1.2.1.1 对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀的影响。取小鼠60只,♀♂兼用,随机分为生理盐水、高粱酒、骨友灵搽剂和嘛呢止痛搽剂大、中、小剂量组。将小鼠背部脊柱两侧脱毛,面积约4cmx5cm,局部搽药,2次/日。给药7天,于末次搽药后30min,将二甲苯0.05ml/只均匀涂于每鼠右耳两侧致炎,致炎后45min,处死大鼠,用打孔器将双耳片打下,分别称重,两耳重量之差为肿胀度;(右耳重-左耳重)/左耳重×100%为其肿胀抑制率,结果(见表1)。
表1 嘛呢止痛搽剂对二甲苯诱发小鼠耳壳肿胀的影响
组别动物数(只)剂量(g/kg)肿胀度(×10��-3�)g肿胀抑制率(%)
生理盐水10△10.8±2.1-
高粱酒10△8.9±2.4-
骨友灵搽剂100.207.7±2.7*28.7
嘛呢止痛搽剂(大)100.367.0±2.5**35.2
嘛呢止痛搽剂(中)100.188.5±2.1*21.3
嘛呢止痛搽剂(小)100.098.6±2.9*20.4
注:t检验,与生理盐水组比较,*p∠0.05,**p∠0.01,△20ml/kg。
由(表1可见),与生理盐水组比较,骨友灵搽剂与嘛呢止痛搽剂各剂量对二甲苯所致的耳壳肿胀均有抑制作用,后者作用明显。
1.2.1.2 对甲醛所致大鼠足跖肿胀的影响。取大鼠60只,♀♂兼用,随机分为生理盐水、高粱酒、骨友灵搽剂和嘛呢止痛搽剂大、中、小剂量组。将各鼠右后踝骨突起处用记号笔作一标记、脱毛,测定搽药前足跖体积值,相应搽药3天。与末次搽药30min后,从右后跖心向踝关节方向皮下注射12%的甲醛0.1ml/10g致炎,测定致炎后0.5、1、3、5、6、24、48和72h的体积值,以致炎后的体积减去搽药前体积作为足跖肿胀度,结果(见表2)。
由(表2可见),骨友灵搽剂与嘛呢止痛搽剂各剂量对大鼠足跖肿胀均有抑制作用。
2.嘛呢止痛搽剂活血作用实验研究
2.1 材料。
2.1.1 药品与试剂。嘛呢止痛搽剂及骨友灵搽剂来源同上,胶原蛋白:自制,取兔胸主动脉,称重,每100mg加NS1ml,匀浆后3000rpm离心10min,取上清液分装,置冰箱中备用。
2.1.2 动物。2.0-2.5kg雄性青紫兰家兔,由兰州生物制品研究所提供,合格证号:医动字第14-004号。
2.1.3 仪器。TYXN-96I型血小板聚集仪、上海通用机电研究所产品。
2.2 实验方法。取家兔,心脏采血5ml,3.8%枸橼酸钠抗凝,以500rpm离心5min,取上层得富血小板血浆(PRP),剩余血浆以3000rpm离心10min,取上层得贫血小板血浆(PPP)。以PPP调PRP,使PRP的血小板数在100-50×108L-1范围内。每次取200ul PRP,分别加入相同体积的蒸馏水、高粱酒、骨友灵搽剂和各剂量嘛呢止痛搽剂,采用比浊法测定由ADP和胶原蛋白诱导的血小板聚集率。实验数据以x±s表示,组间比较采用t检验,结果(见表3)。
嘛呢止痛搽剂对ADP和胶原蛋白诱导的血小板聚集均有明显的抑制作用,提示该药有改善局部血液循环的作用。
3.讨论
颈肩腰腿痛,是临床常见病和多发病,属于中医“痹症”的范畴,其主要病机为寒湿瘀血阻络,因此其主要治法为祛寒除湿,通络止痛,嘛呢止痛搽剂的组方主要为巴罗、休布、桑荡、小白花蛇、丁香、肉桂等,巴罗、休布、桑荡、小白花蛇均具有祛寒除湿,通络止痛之功,善祛皮里膜外之寒湿,尤其小白花蛇为血肉有情之品,禀高寒阴冷之精气,通走机体经络,具有搜风祛湿之效,是藏药治疗颈肩腰腿痛的主药,配合中药丁香、肉桂温中散寒。本实验发现:嘛呢止痛搽剂各剂量对二甲苯诱发的小鼠急性渗出性炎症、毛细血管通透性的增加具有明显的抑制作用;对甲醛引起的慢性炎症也有一定的抑制作用;对ADP和胶原蛋白诱导的血小板聚集均有明显的抑制作用,提示该药有改善局部血液循环的作用。故嘛呢止痛搽剂治疗颈肩腰腿痛的又一可能机理为通过抑制炎症反应和血小板的聚集,改善局部血液循环。
