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摘 要：目的：比较不同精制工艺对葛根水提液的影响。方法：采用醇沉、离心-20 nm陶瓷膜微滤、壳聚糖絮凝澄清3种工艺对葛根水提液进行精制，测定精制后水提液中的指标成分，考察3种精制工艺葛根素保留率、总黄酮保留率、除杂率。结果：葛根水提液经醇沉、离心-20 nm陶瓷膜微滤、壳聚糖絮凝澄清3种工艺处理后其葛根素的保留率分别为79.4%、91.5%、92.8%；总黄酮的保留率分别为71.9%、94.7%、92.7%；固形物除杂率分别为42.7%、36.9%、30.6%。结论：离心-20 nm陶瓷膜微滤、壳聚糖絮凝澄清工艺优于醇沉工艺，其中离心-20 nm陶瓷膜微滤具有简化工艺、缩短操作时间的优点，可作为葛根水提液最佳精制工艺。
关键词：葛根；精制工艺；醇沉；陶瓷膜微滤；壳聚糖
中图分类号：R282.6 文献标识码：A
文章编号：1007-2349（2011）08-0069-02
中药水提液往往含有药渣、泥沙、纤维、树脂、油脂、细菌等杂质,且体积较大,给制剂带来困难，通常需要进一步精制。醇沉法是中药水提常用的精制工艺,尽管醇沉法具有澄清药液、减少服用量等优点,但也存在许多不足,如有效成分损失严重、生产成本高、周期长、安全性差等缺点。近年来用膜分离、吸附澄清等方法取代醇沉法的研究比较多。本文选择醇沉、离心-20 nm陶瓷膜微滤、壳聚糖絮凝澄清3种精制工艺对葛根水提液进行精制，比较3种精制工艺的葛根素保留率、总黄酮保留率、除杂率，为下一步精制或制剂研究打下基础。
1 设备与材料
葛根购于广西玉林市中桂药材有限公司（经鉴定符合《中国药典》2005版要求）；SJM-FHM型陶瓷复合膜设备（合肥世杰膜工程有限责任公司）；20 nm陶瓷复合膜管（合肥世杰膜工程有限责任公司）； GQLB-75型管式分离机；壳聚糖（济南海得贝海洋生物工程有限公司）；日本岛津LC-2010A 高效液相色谱仪；岛津LCsolotion色谱工作站；UV2450紫外分光光度仪，葛根素对照品（批号：110752-200511）购于中国药品生物制品检定所。甲醇（色谱纯），流动相用水为自制双蒸水，其它试剂均为分析纯。
2 提取与精制
2.1 提取工艺 取葛根10 kg，加水煎煮2次，第1次加10倍量水，煎煮2 h，第2次加9倍量水，煎煮1 h，合并煎液，滤过，滤液均分为10份备用。
2.2 精制工艺
2.2.1 醇沉法 取2.1项滤液3份，分别浓缩至相对密度为1.15（60℃），加入乙醇使含醇量达到70%，静置24 h，砂芯滤过，滤液回收乙醇，浓缩至药液：生药为1∶1，得3份浓缩液样品，编号分别为：A、B、C。
2.2.2 离心-20 nm陶瓷膜微滤法 另取2.1项滤液3份，分别浓缩至药液：生药为4∶1，浓缩液高速离心（30000 r/min），再微滤，微滤陶瓷膜孔径为20 nm，微滤液浓缩至药液：生药为1∶1，得3份浓缩液样品，编号分别为：D、E、F。
2.2.3 壳聚糖絮凝澄清法 另取2.1项滤液3份，分别浓缩至相对密度为1.15（60 ℃），按0.0008 g壳聚糖/1 g生药的比例加入0.1%壳聚糖溶液，静置24 h，取上清液，砂芯滤过，滤液浓缩至药液：生药为1∶1，得3份浓缩液样品，编号分别为：G、H、I。
3 样品测定
3.1 葛根素测定 参照《中国药典》2005版一部第233页葛根项下方法测定。
3.2 总黄酮测定
3.2.1 对照品溶液的制备 精密称取葛根素对照品5 mg，置10 mL容量瓶中，加30%乙醇适量溶解，加乙醇至刻度，摇匀，再精密吸取1mL置25 mL容量瓶中, 加30%乙醇至刻度，即得。
3.2.2 标准曲线的制定 精密量取对照品溶液1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL，分别置10 mL容量瓶中，加30%乙醇至刻度定容。以30%乙醇为空白，依照紫外-可见分光光度法（中国药典2005年版一部附录VA），在250 nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程y=78.9x+0.0286，r=0.9998,线性范围：0.002 mg/mL～0.010 mg/mL。
3.2.3 样品测定法 精密量取样品0.2 mL，置50 mL具塞锥形瓶中，精密加入30%乙醇50 mL，密塞，称定重量，超声处理15 min，放冷，再称定重量，加30%乙醇补足减失重量，再精密量取续滤液0.2 mL，置10 mL容量瓶中，250 nm波长处测定吸收度，计算含量。
3.3 含固量测定 参照《中国药典》2005版一部附录ⅩA浸出物测定法，取样品液适量浓缩干燥，称定重量，计算除杂率。
4 结果分析
分别对以上9份样品进行检测，比较3种精制工艺的葛根素保留率、总黄酮保留率及除杂率，结果见表1。
表1表明：葛根水提液分别用醇沉、离心-20 nm陶瓷膜微滤、壳聚糖絮凝澄清3种工艺精制后，离心-20 nm陶瓷膜微滤、壳聚糖絮凝澄清两种工艺葛根素及总黄酮的保留率均在90%以上，明显高于醇沉工艺，而醇沉工艺的除杂率较高，离心-20 nm陶瓷膜微滤工艺适中，壳聚糖絮凝澄清工艺除杂率效果相对较差。
5 讨论
综上所述，醇沉精制工艺除杂率最高，但指标成分保留率较低，且乙醇用量大，生产周期长。采用壳聚糖絮凝澄清工艺指标成分保留率较好，除杂率偏低，生产周期长。离心-20 nm陶瓷膜微滤精制后指标成分保留率较好，除杂率适中，且简化工艺，缩短生产周期。初步比较离心-20 nm陶瓷膜微滤精制工艺较适合用于葛根水提液的精制。
（收稿日期：2011-04-21）
