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【摘要】 2008年5月笔者从患者分泌物脓汁中培养分离出1株触酶试验阴性的金黄色葡萄球菌。通过细菌学鉴定,革兰氏染色、显微镜下细菌形态学检查和重要的触酶试验及血浆凝固酶试验,及若干生化试验及生化鉴定编码对其确认,并对其做药敏试验,以指导临床正确用药,达到治愈的目的。同时进一步认识细菌本身某些因素的变异性。 �
【关键词】 金黄色葡萄球菌;触酶试验;生化鉴定
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1 病例资料�
门诊患者,女性,18岁,因嘴角裂口产生脓性分泌物并形成厚膜,而疼痛肿胀、功能受限1月余。在此期间,曾用头孢曲松纳、庆大霉素、青霉素等抗菌素抗炎,未见效果。检查体温正常;实验室检查:白细胞 11.8×10.9/L , 中性分叶粒细胞69%,淋巴细胞26% ,单核细胞 3%; 嗜酸性粒细胞2%;红细胞4.4×1012/L,血红蛋白131 g/L,血小板192×10�9/L。后经药敏结果指导,用红霉素治疗痊愈。�
2 细菌学鉴定�
2.1 取患者患处脓性分泌物,分别接种于肉浸汤液体培养基、含10%氯化钠的高盐培养基及固体培养基(普通培养基、含血液平板、), 5% 二氧化碳35°C 24 h后,生长情况:固体培养基上生长出光滑、湿润、圆型、凸起、不透明、有光泽、直径约1～2 cm的白色菌落;含血液培养基平板上所生长的菌落周围,有明显透明溶血环;肉浸汤液体培养基中迅速生长、呈均匀混浊,管底有少量沉淀、摇动时容易消散,不产生色素。培养出的细菌极易被硷性染料着色,即革兰染色呈阳性。显微镜下菌体为圆形,并以单、双、形似葡萄状不规则排列;液体培养基中,因菌体有时可作平面分裂有部分呈短链存在。无动力、无芽胞、无荚膜。菌体较小、大小比较均匀一致。�
2.2 与链球菌鉴别 链球菌经相同条件下培养,固体培养基上菌落形态为灰白色,半透明,直径约0.5～0.75 cm,圆形凸起小菌落,溶血现象不定;在液体培养基中,呈絮状或颗粒状沉淀生长。在显微境下革兰氏染色阳性,菌体为链状排列,长短不一,长者可达20～30个菌细胞组成。菌体为圆形或卵圆形。�
2.3 与微球菌鉴别 微球菌菌落在固体培养基上略小于葡萄菌菌落,为圆形突起、不透明、黄色或粉红色,有粘性,并不易混悬于盐水中,在液体培养基中均匀混浊生长、表面有菌膜。镜下革兰氏染色阳性,菌体较葡萄球菌稍大,四联排列为主,或呈不规则的团块,脓汁中可产生荚膜。�
3 触酶试验�
挑取菌落于洁净载玻片上(避免混入培养基),滴加新鲜配制的3%过氧化氢试剂一滴于菌落上并仔细观察结果,菌落上未出现气泡。同时以金黄色葡萄球菌ATCC25923为阳性对照,以粪肠球菌ATCC29212为阴性对照,判定此株金黄色葡萄球菌触酶试验为阴性。�
4 生化试验�
4.1 此菌血浆凝固酶试验阳性;杆菌肽敏感试验阳性;呋喃唑酮敏感试验阴性;发酵葡萄糖产酸试验阳性;能分解果糖、半乳糖、甘露醇、核糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、甘露糖、松二糖、藻糖产酸,不产生吲哚,甲基红试验阳性,VP试验阳性;金黄色葡萄球菌抗体胶乳凝集试验阳性;其代谢方式为呼吸兼发酵,对1.6 ul/ml新生霉素耐药,可使美蓝、石蕊等染料还原为无色,能分解尿素而产氨,磷酸酶试验阳性。明胶液化试验阳性,硝酸盐还原试验阳性,32STAPH 35°C孵育24 h,经ATB仪器鉴定,生物编码为267312610,其可信度为99.3%,鉴定结果为金黄色葡萄球菌。�
4.2 与链球菌鉴别 链球菌血浆凝固酶试验为阴性。�
4.3 与微球菌鉴别 发酵葡萄糖产酸试验阴性;杆菌肽敏感试验阴性;呋喃唑酮敏感试验阳性。�
5 药敏试验:采用Kirby�Bauer法�
结果:此菌对青霉素耐药、对克林霉素耐药、对庆大霉素耐药;对万古霉素敏感、对苯唑青霉素敏感、对红霉素敏感、对氧氟沙星敏感、对复方新诺明敏感、对呋喃妥因敏感、对头孢唑林敏感。�
6 小结�
金黄色葡萄球菌为伤口化脓感染常见菌群。典型的金黄色葡萄球菌为:革兰氏染色阳性,在革兰阳性球菌中菌体比较小,常单个或呈双存在或成短链、不规则葡萄状排列。最适pH为7.4,其菌落形态在普通平板上,经35°C培养箱中培养24 h为光滑、湿润、白色菌落,菌落周围有透明溶血环,产生胞外酶也就是血浆凝固酶试验阳性,其触酶试验阳性。据上所述特征,即可鉴定金黄色葡萄球菌。而此次分离出的金黄色葡萄球菌其触酶试验为阴性。在实际工作中较为少见,报道也很少。�
参 考 文 献�
[1] 陶月, 张之烽, 宁明哲,等. 触酶阴性的金黄色葡萄球菌一例. 临床检验杂志,2008, 26(3) :172.�
[2] 丁振若, 于文彬, 苏明权,等. 现代检验医学.人民军医出版社, 2007: 1102�1110.�
