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摘 要：目的：制订众生胶囊的质量标准。方法：以薄层色谱法对紫花地丁和人工牛黄进行定性鉴别，以高效液相色谱法对黄芩中的黄芩苷进行含量测定。结果：供试品在与对照物相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；黄芩苷在38.16~95.40μg/mL之间呈良好的线性关系，平均回收率为97.82%，RSD为1.0%。结论：本测试方法准确可靠，操作简便，可作为质量控制的有效方法。
关键词：众生胶囊；薄层色谱法；鉴别；高效液相色谱法；含量测定
中图分类号：R284.1文献标识码：A文章编号：1673-2197（2008）09-0029-03
众生胶囊是广东众生药业股份有限公司的新药产品，是广东省名牌产品众生丸的系列新品种。本品由古方普济消毒饮、仙方活命饮、五味消毒饮优化组方制成，具有清热解毒、活血凉血、消炎止痛的功效，用于咽喉炎、扁喉腺炎、疮毒等，有中药抗生素的美誉。众生胶囊崩解溶散快，显效迅速而未见不良反应，在系列产品中具有相对的优势。现将质量标准中主要药物的测试报道如下。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪（美国TSP公司 p1000）；紫花地丁对照药材（编号：121429-200501）、胆酸（编号：00789312）、黄芩苷对照品（编号：110715-200514），均为中检所提供；众生胶囊（批号：060301、060302、060303，规格0.4g/粒），广东众生药业股份有限公司提供；其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 紫花地丁鉴别
2.1.1 供试品溶液的制备
取供试品的内容物2g，加甲醇20mL，超声处理10min，滤过，滤液蒸干，残渣加热水10mL使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。
2.1.2 阴性对照溶液的制备
取药方中除紫花地丁的药材，按工艺要求制成阴性供试品，照供试品溶液的制备即得。
2.1.3 对照药材溶液的制备
取紫花地丁对照药材2g，加水50mL，煎煮30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇20mL，照供试品溶液的制备即得。
2.1.4 薄层鉴别
照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(5∶3∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与紫花地丁对照药材色谱的相应位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照色谱无干扰。见图1。
1~3供试品 4紫花地丁对照药材 5阴性对照品
2.2 人工牛黄鉴别［4］
2.2.1 供试品溶液的制备
取供试品的内容物2g，加三氯甲烷25mL，超声处理20min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。
2.2.2 阴性对照溶液的制备
取药方中除人工牛黄的药材，按工艺要求制成阴性供试品，照供试品溶液的制备即得。
2.2.3 对照品溶液的制备
取胆酸对照品适量，加乙醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液。
2.2.4 薄层鉴别
照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇(20∶25∶2∶3)的上层液溶为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃烘至显色清晰，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与胆酸对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照色谱无干扰。见图2。
2.3 黄芩的含量测定［5］
2.3.1 色谱条件
DIKMAC!8(4.6x150mm.5μm) 色谱柱，流动相为甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2），检测波长280nm，理论板数按黄芩苷对照品峰计算，不得少于2500.
2.3.2 对照品溶液的制备
精密称取经60℃干燥4h的黄芩苷对照品12.72mg，置10mL量瓶中，加甲醇至刻度定容，取溶液5mL置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作对照品储备液。分别取储备液3、4、5、6、7及7.5mL置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，得38.16，50.88，63.60，76.32，89.04和95.40μg/mL的对照品溶液。
2.3.3 供试品溶液的制备
取供试品的内容物0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇25mL，密塞，精密称定，超声处理15min取出，放至室温，精密称定，用70%乙醇补足减失的重量，滤过，滤液作为供试品溶液。
2.3.4 阴性对照溶液的制备
取处方除黄芩的药材，按工艺要求制成阴性供试品，同法制得阴性对照溶液。
2.3.5 测定法
分别取对照品溶液(63.60μg/mL)、供试品溶液和阴性对照溶液各10μL，注入液相色谱仪测定，即得。见
图3~5。
2.3.6 线性关系的考察
分别取38.16，50.88，63.60，76.32，89.04和95.40μg/mL对照品溶液各10μL注入高效液相色谱仪，以对照品浓度为横坐标，峰面积作纵坐标，进行线性回归，得回归方程为y=4740.9x-58893.6，r=0.9998，结果表明黄芩苷在38.16~95.40μg/mL范围内，呈良好的线性关系。见图6。
2.3.7 精密度试验
取同一对照品溶液，连续进样6次，测定其峰面积平均为2959263，RSD为0.6%。
2.3.8 稳定性试验
取同一供试品溶液按测定法测定，时间间隔为0.5h，1h，2h，3h，4h，峰面积的RSD为0.8%。结果表明，供试品溶液在4h内稳定。
2.3.9 重复性试验
取同一供试品溶液按测定法进样5次，计算，其平均含量为1.52mg，RSD为0.8%。
2.3.10 加样回收试验
取已知含量的供试品内容物6份（约0.25g/份），分别精密称定置25mL量瓶中，各加入黄芩苷对照品溶液（0.72mg/mL）1.0、1.25和1.5mL（每个量级2份），加入70%乙醇20mL，超声处理15min，取出，放至室温，加70%乙醇至刻度，摇匀，滤过，分别取滤液进样测定。结果见表1。
2.3.11 样品的含量测定
取供试品三批，按上述色谱条件、溶液制备和测定法，结果每粒胶囊平均含量为1.36，1.52和1.67mg。
3 讨论
众生胶囊共由十七味中药组成，其中黄芩为原普济消毒饮的主药，故作含量测定。紫花地丁与蒲公英为原五味消毒饮中的主药，人工牛黄是贵细药，又是为增进清热解毒功效的要药，故均作薄层色谱定性鉴别。蒲公英的薄层色谱鉴别，因干扰较多未能成功。
薄层色谱鉴别专属性强，直观可靠。紫花地丁的薄层色谱主斑点Rf为0.67；人工牛黄的薄层色谱与胆酸对照品相应的斑点Rf为0.25。
黄芩的含量测定以其主要成分黄芩苷计算，其方法学考察符合要求。根据数批供试品的测定结果，拟订本品每粒含黄芩苷不得少于1.2mg，以利于对产品质量的控制。
参考文献：
［1］ 庞俊忠.方剂学［M］.北京：中国医药科技出版社，1986.
［2］ 周新蓓，欧阳荣.常用中药饮片质量检验［M］.长沙：湖南科学技术出版社，2006.
［3］ 中国药典委员会.中国药典（一部）［S］.北京：化学工业出版社，2005.
（责任编辑：王尚勇）
