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[摘要] 目的 观察乌司他汀对肠手术患者术后肠黏膜屏障功能的影响。方法 2010年1~12月本院普外科行肠手术患者80例，随机分为乌司他汀低剂量组和乌司他汀高剂量组各40例。手术前及手术后两组分别静脉滴注乌司他汀20万U/d和10万U/d。分别于手术前、手术后2、4天测定两组患者尿乳果糖与甘露醇的比值（L/M）、血浆谷氨酰胺（Gln）、外周血细菌DNA。结果 两组患者术后L /M、Gln逐渐升高，外周血细菌DNA阳性率逐渐降低（P＜0.05）；两组间差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 乌司他汀通过改善肠道黏膜通透性、升高Gln，对肠手术患者肠黏膜屏障功能具有明显保护作用，对预防创伤引起的肠道细菌移位具有重要临床意义。
[关键词] 肠黏膜屏障；乌司他汀；肠手术
[中图分类号] R65 6[文献标识码] B [文章编号]1673-9701（2011）21-34-02
Effects of Ulinastatin on Intestinal Mucosa Barrier in Patients with Intestinal Surgery
YING Yanghuo
Zhejiang Province Cixi City Longshan Public Health Center , Cixi 315326, China
[Abstract] Objective To investigate the effects of ulinastatin on intestinal mucosa barrier in patients with intestinal surgery. Methods Eighty patients with intestinal surgery who visited general surgery department from January 2010 to December 2011 were randomly divided into low dosage group and high dosage group 40 cases in each group. Cases in low dosage group or in high dosage group received 200000 U or 100000 U of ulinastatin daily before and after operation. Ratio of lactulose and mannitol in urine (L/M), glutamine level in plasma and DNA in peripheral blood were determined before operation，2nd and 4th day after operation. Results L/M and glutamine level in plasma were gradually increased and DNA in peripheral blood was decreased after operation （P＜0.05）, and there were significantly different in both groups（P＜0.05）. Conclusion Ulinastatin can protect the intestinal mucosa barrier by improving the permeability of intestinal mucosa and increase glutamine level in plasma, and prevent the endotoxin translocation from intestine caused by trauma.
[Key words] Intestinal mucosa barrier; Ulinastatin; Intestinal surgery
严重创伤和手术等应激状态造成的血流动力学的剧烈改变以及缺血再灌注均可损害肠黏膜屏障、诱导肠道细菌移位，并由此诱发全身炎症反应综合征、脓毒症、多器官功能障碍综合征，甚至死亡[1]。乌司他汀为蛋白水解酶抑制剂，作为免疫调节剂在临床上应用广泛[2]。动物实验显示，乌司他汀对梗阻性黄疸以及缺血再灌注大鼠的肠黏膜屏障功能具有改善作用[3,4]。本文研究乌司他汀对肠手术患者肠黏膜屏障功能保护作用进行研究，现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
2010年1 ～12月本院普外科择期进行肠手术（小肠切除术、空肠修补术和阑尾切除术等）患者80例纳入本次研究。所有纳入患者入组前均签署知情同意书。两组患者一般临床资料见表1。两组患者性别、年龄、手术时间及手术分类差异无统计学差异（P＞0.05）。
1.2治疗方法
所有纳入患者随机分为乌司他汀低剂量组和乌司他汀高剂量组各40例。所有患者在行手术治疗及其他综合治疗基础上，手术前及手术后4d两组患者分别静脉滴注乌司他汀（生产单位：广东天普生化医药股份有限公司；规格：1mL:5万U；批号：200901012）20万U/d和10万U/d，共5d。
1.3观察指标及方法
手术前、术后2d及术后4d检测腹部手术患者的血浆Gln 浓度、尿L/M比值和外周血中细菌DNA阳性率。血浆谷氨酰胺（Gln）浓度和尿L/M比值由高效液相色谱法（HPLC）测定；外周血细菌DNA由PCR 技术检测。
1.3.1血样的处理分别于术前、术后2d 和4d，在无菌条件下抽取患者肘静脉血2mL于肝素钠离心管中，离心后抽取上层血浆，加入Pall 离心超滤管在高速台式离心机中离心后于-70 ℃保存待检。
1.3.2尿样的处理于术前、术后2 d和术后4 d 采集。采集前天晚上患者禁食但不禁水。采集尿液的当天早晨排空膀胱后，口服或经胃管注入测试液50 mL（含乳果糖10 g和甘露醇5 g），半小时后可以饮水，2h后可以正常饮食，收集6 h尿液。混合均匀后加入2%硫柳汞后于-20 ℃下保存。测定前将尿液经孔径22 μm 虑膜过滤后于-20 ℃下冷冻。将冻结的尿液放入低温真空冷冻干燥机干燥，约浓缩10倍后，放入Pall 超滤管中，用生物冷冻离心机4 ℃下离心后于-70 ℃保存待检。
1.3.3PCR检测引物设计: 采用靶基因为大肠杆菌特异性β半乳糖苷酶基因的BG-1、BG-4和所有细菌共有的16S rRNA 基因的高度保守区引物16S rRNA +、16S rRNA -。用细菌基因组DNA 提取试剂盒提取纯菌及全血DNA进行PCR 扩增, 用琼脂糖凝胶电泳检测PCR 产物[5]。
1.4统计学处理
使用SPSS 13.0 统计软件进行数据的统计分析。计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为有显著性差异。
2结果
2.1两组患者L/M的比较
两组患者L/M的比较见表2。手术前两组患者L/M差异无统计学意义（P＞0.05）。术后第2、4日两组患者L/M较手术前显著升高（P＜0.01），组间比较差异有统计学意义（P＜0.01）。
2.2两组患者血浆Gln浓度的比较
两组患者血浆Gln浓度的比较见表3。手术前两组患者血浆Gln浓度差异无统计学意义（P＞0.05）。术后第2、4日两组血浆Gln浓度较手术前显著降低（P＜0.01），组间比较差异有统计学意义（P＜0.01）。
2.3两组患者外周血细菌DNA阳性率的比较
手术前两组患者外周血细菌DNA均为阴性。术后第2、4日乌司他汀低剂量组外周血细菌DNA阳性的患者分别为5例（12.5%）和6例（15%），较治疗前差异具有统计学意义（χ2=5.333和χ2=6.4865，P＜0.05）；高剂量组外周血细菌DNA阳性的患者分别 2例（5%）和3例（7.5%），较治疗前差异无统计学意义（χ2=2.0513和χ2=3.1169，P＞0.05）。高剂量组外周血细菌DNA阳性率低于低剂量组， 但差异无统计学意义（χ2=1.4090和 χ2=1.1268，P＞0.05 ）。
3讨论
乌司他汀是一种广谱的蛋白酶抑制剂，能够抑制多种蛋白、糖和脂类水解酶的活性。乌司他汀有多种药理作用，除抑制多种水解酶的活性外还参与抗炎过程外还有增强机体免疫力、改善微循环等作用。大量的临床研究显示，乌司他汀在治疗急性胰腺炎、休克、改善手术预后, 尤其是减少体外循环并发症等方面有着重要的作用[6]。
L/M是临床最常用反映肠道黏膜通透性的指标，可以准确反映肠黏膜损害的程度。据文献报道，对手术、创伤手术等可以使胃肠道的通透性升高[7]。本试验结果显示，乌司他汀高剂量组患者L/M较低剂量组显著低于低剂量组（P＜0.01）。因此，乌司他汀可以降低肠手术创伤患者的肠黏膜通透性。在创伤、手术等应激状况下，由于损伤组织丢失Gln增加以及损伤组织中炎性细胞对Gln 利用增加，使体内Gln耗竭，而补充Gln能改善肠黏膜结构和通透性[8]。本试验结果显示，高剂量乌司他汀较低剂量乌司他汀能提高肠道患者血浆Gln浓度（P＜0.05）。因此，乌司他汀可以提高肠手术创伤患者血浆Gln浓度。胃肠外科术确实存在肠黏膜屏障损害，并与细菌位移相关[5]。本试验结果显示，乌司他汀高剂量组较低剂量组外周血细菌DNA阳性率具有降低的趋势，但无统计学意义（P＞0.05）。这可能与本次试验的样本量比较小有关，因此需要更大样本量的试验来确认。
总之，乌司他汀通过改善肠道黏膜通透性、升高Gln对肠手术患者肠黏膜屏障功能具有明显保护作用，对预防创伤引起的肠道细菌移位具有重要临床意义。
[参考文献]
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[8] Elia M, Lunn PG. The use of glutamine in the treatment of gastrointestinal disorders in man [J]. Nutrition, 1997, 13 (7-8): 743-747.
（收稿日期：2011-04-20）
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