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【摘要】 目的 比较分析两个不同厂家试剂检测EB病毒早期抗原IgA抗体(EA-IgA)、衣壳抗原IgA抗体(VCA-IgA)，并做方法学评价。方法 分别用两个不同厂家的ELISA试剂盒检测184例鼻咽癌(NPC)患者及184例正常人的血清EA-IgA和VCA-IgA。结果 与欧蒙公司的试剂盒相比，IBL公司的试剂EA-IgA的阳性符合率为66.07%，阴性符合率为89.45%，总符合率为82.34%，Kappa值为0.57；VCA-IgA的阳性符合率为67.57%，阴性符合率为99.32%，总符合率为80.16%， Kappa值为0.62。结论 两个厂家的试剂盒在分别验证EA-IgA，VCA-IgA时，具有高度一致性。国内IBL公司生产的试剂可替代进口试剂。
【关键词】 EB病毒；鼻咽癌；EA-IgA；VCA-IgA
Comparison of the two kits from two different manufacturers in detecting EA-IgA and VCA-IgA of Epstein-Barr virus
LUO Ling， ZENG Hua， LUO Xiao-hong. The Sun Yat-sen Memorial Hospital of Sun Yat-sen University,GuangZhou 510120,China
【Abstract】 Objective To evaluate the two kits from two different manufacturers in detecting EA-IgA and VCA-IgA of Epstein-Barr virus, then provide the methodology evaluation. Methods The serum of EBV-EA-IgA and VCA-IgA in 184 Nasopharyngeal patients and 184 healthy adults were detected use two kits.Results Compared with the kit of EUROIMMUN, for the kits of IBL to detect EA-IgA, the positive coincidence rate was 66.07%, negative coincidence rate was 89.45% and the total coincidence rate was 82.34%, with Kappa value of 0.57; for VCA-IgA, the positive coincidence rate was 67.57%, negative coincidence rate was 99.32% and the total coincidence rate was 80.16%, with Kappa value of 0.62. Conclusion The two kits have high consistence in screening of EA-IgA and VCA-IgA. The IBL kit produced by the domestic may be a substitute for imported reagents.
【Key words】 Epstein-Barr virus; Nasopharyngeal cancer; IgA antibodies against the early antigen of Epstein-Barr virus (EA-IgA); IgA antibodies against the viral capsid antigen of Epstein-Barr virus (VCA-IgA)
EB病毒(Epstein-Barr)感染与鼻咽癌等人类恶性疾病的发生密切相关，对诊断鼻咽癌有较高的特异性。定性检测血清中EB病毒抗体已成为早期诊断鼻咽癌的有力工具。近年来随着免疫分析技术的发展，国内外已广泛采用ELISA法检测EB病毒抗体用于鼻咽癌的诊断和筛查。本文就两个不同厂家的试剂盒在检测EB病毒EA-IgA、VCA-IgA的临床价值进行比较。
1 资料与方法
1.1 标本来源 收集本院2010年1月1日至2010年12月31日在门诊和住院部经病理检查确诊为鼻咽癌的患者的血清标本184例，另外本院同期健康体检者的血清标本184例，年龄为25~65岁。
1.2 试剂
1.2.1 国内IBL公司生产的EB病毒EA-IgA试剂，批号：EAA-158；VCA-IgA试剂，批号：EBA-193。
1.2.2 德国欧蒙公司生产的EB病毒EA-IgA试剂，批号：E100708BO；VCA-IgA试剂，批号：E100909AR。两个厂家的试剂均在有效期内使用。
1.3 仪器 MULTISKAN MK3酶标仪(芬兰雷勃)，HHB型电热恒温温育箱(广州)等。
1.4 方法 实验操作严格按照说明书进行，常规条件下进行测定。对于检测结果不一致的样本，则需要结合留样样本原来的病理及临床诊断结果作为金标准进行判断，如果临床留样前病理检测结果为阳性，或者临床诊断为鼻咽癌，则样本判为真阳性(实验试剂阳性时)，或者假阴性(实验试剂阴性时)；如果临床留样前病理检测结果为阴性，则判为真阴性(实验试剂阴性时)，或者假阳性(实验试剂阳性时)。对比两个厂家试剂的检测结果，比较分析两种试剂的阳性符合率，阴性符合率以及总体符合率，采用卡帕检验，验证方法的一致性。卡帕检验采用Cohen氏法。当卡帕值为0.4~0.7 h，两种方法具有高度一致性；当卡帕>0.75时，两种方法具有极端的一致性。
2 结果
2.1 两个试剂盒检测结果与临床病理检测结果比较
欧蒙试剂检测EA-IgA的诊断效率为73.91%，IBL试剂检测EA-IgA的诊断效率为74.18%。欧蒙试剂检测VCA-IgA的诊断效率为76.09%，IBL试剂检测VCA-IgA的诊断效率为81.25%。两者比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表1和表2。
2.2 IBL试剂与欧蒙试剂的符合率统计
2.2.1 IBL试剂与欧蒙试剂检测EA-IgA的对比 阳性符合率为66.07%；阴性符合率为89.45%；总符合率为82.34%。Kappa值=0.57，说明此两个试剂盒在验证EA-IgA时，具有高度一致性。见表3
2.2.2 IBL试剂与欧蒙试剂检测VCA-IgA的对比 阳性符合率为67.57%；阴性符合率为99.32%；总符合率为80.16%。Kappa值=0.62，说明此两个试剂盒在验证VCA-IgA时，具有高度一致性。见表4
3 讨论
EB病毒(Eostein-Barr virus, EBV) 是1964 年Epstein 和Barr 在研究非洲儿童的恶性淋巴瘤时, 从瘤细胞培养中发现的一种嗜人类B淋巴细胞的γ疱疹病毒，能够在B淋巴细胞中建立起隐性感染，刺激细胞的增生与转化，基因组全长184 kb。目前可感染人类的EBV 有两种亚型: EBV-1和EBV-2, 其区别在于编码核抗原的基因构成不同。EBV可引起两种不同类型的感染, 一种是增殖性感染, 另一种是非增殖性感染, 在一定条件下或某些诱导因子的作用下, 潜伏的EBV基因组可被激活而转化为增殖性感染［1］。被病毒感染的细胞可产生各种抗原,能刺激机体产生相应的抗体，EB病毒的抗原成分有:EB病毒核抗原(EBNA)、早期抗原(EA)和晚期抗原等，病毒的晚期抗原主要有组成病毒核衣壳的病毒衣壳抗原(VCA)、淋巴细胞识别病毒靶抗原(YDMA)和病毒的晚期膜抗原(MA)。EB病毒引发了全球癌症的1%,并占所有感染性癌症的5.6%，根据国际癌症研究署对致癌因子的分类标准,EB病毒被列在第一组致癌因子中。EBV感染与多种人类肿瘤发生相关,包括鼻咽癌(NPC)、伯基特淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、胃癌等,NPC与Burkitt淋巴瘤的发生具有明显的地区限制,据WHO统计,大约80%的NPC发生在中国［2］。
大量研究已证明:EB病毒与鼻咽癌关系密切,EB病毒VCA-IgA抗体可出现于鼻咽癌确诊前4~46个月,VCA-IgA 抗体阳性鼻咽癌发生率是抗体阴性发生率的111.5倍,通过免疫酶法检测人群血清EB病毒VCA-IgA高危人群,对鼻咽癌的早期诊断有重要意义，目前常规应用的EB病毒血清学检查项目VCA-IgA和EA-IgA仍是鼻咽癌患者临床筛查、辅助诊断以及判断的疗效的观察指标［3］。对于就诊的患者及时、准确地作出病原学诊断，就可以为临床医生提供诊治依据，及时采取治疗措施保证患者健康。
目前很多医院采用进口的德国欧蒙公司生产的试剂来进行EA-IgA和VCA-IgA抗体检测，但进口试剂价格较贵，我们用国内IBL公司生产的试剂和进口试剂比较，从实验数据可知，德国欧蒙公司生产的EA-IgA和VCA-IgA试剂对NPC的诊断效率与国内IBL公司生产的EA-IgA和VCA-IgA试剂的差异无统计学意义。两个厂家生产的试剂盒检测的符合率比较，在分别验证EA-IgA和VCA-IgA时，Kappa值分别为0.57和0.62，具有高度一致性。可以认为，国内IBL公司生产的EA-IgA和VCA-IgA试剂盒可以和进口的德国欧蒙公司生产的试剂盒相媲美，符合临床要求，能较好的检测EB病毒感染者血清中的IgA抗体，起到辅助临床诊断鼻咽癌的作用。而且国产试剂的价格比进口试剂便宜，可以代替进口试剂进行临床应用。
参 考 文 献
［1］ 刘勇，杨海玉，路名芝.EB病毒与肿瘤的关系.江西医药,2007，42(4)：354-355.
［2］ 陈莉,朱远源.肿瘤研究的新热点-EB病毒.肿瘤防治研究，2008，35(10)：750-754.
［3］ 唐国全，周向阳，阳茂春.EB病毒IgA滴度在鼻咽癌诊断的敏感性和特异性.广西医学，2008，30(6)：831-832.
注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文
