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关键词：水提三七皂苷；缓解体力疲劳；实验研究 中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1007－2349(2007)09－0039－02
疲劳是机体在一定环境条件，由于长时间或过度紧张的体力或脑力劳动而引起的劳动效率趋向下降的状态，它是机体的一种防御反应，是机体组织和器官兴奋性下降而带来工作效率的降低。随着经济发展和社会竞争的日趋激烈，人们的生活节奏日益加快，工作压力日益提高，处于疲劳或过度疲劳等亚健康状态的人群比例不断上升。开发具有抗疲劳作用的保健药品，具有重要的现实意义。
水提三七皂苷是以云南文山地道药材三七(Pnanaxnotoginseng)的地下根、根茎为原料，在中医药理论指导下，用王兴文教授“中药水提专有技术”提取、分离、精制而得到的。水提三七皂苷含人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、雕、Rg1、Rg2、Rh，三七皂苷R1、R2、R3、R4、R6等二十多种皂苷成分。具有多种功效和治疗作用。水提三七皂苷胶囊是以水提三七皂苷制成的纯中药口服制剂，与市场同类产品比较，具有微量、速效、高效等特点。本实验旨在研究三七皂苷对缓解体力疲劳的影响。
1 材料和方法
1．1 样品及供试液制备 由云南红云生物工程技术有限公司提供三七皂苷胶囊，胶囊内容物为灰白色粉未，规格为330mg/粒，样品批号：20021212。人体推荐量为每人(成人)每日2次，每次1粒，按60kg体重折算成11mg/kg．BW。室温保存。试验前用蒸馏水配成试验所需浓度的溶液作为供试液。
1．2 动物选用广西医科大学医学实验动物中心[批准号为：桂动许字(2000)第001号]繁殖的清洁级(Ⅱ级)健康成年昆明种雄性小鼠184只，体重为18～26克，分为4批，每批44～48只。实验动物房合格证号：桂医动字第23003号。动物室温度：22～25℃，相对湿度：55～70％。
1．3 选择与受试物给予方式根据该样品的人体推荐量，设55、110、220mg/kg．BW(分别相当于人体推荐量的5、10、20倍)3个剂量的实验组，同时设1个阴性对照组(给蒸馏水)。每组11～12只动物。采用经口方式给予受试物，按每10g体重0.2ml的容量灌胃。
1．4主要仪器与试剂
1．4．1 仪器动物天平、电子分析天平、离心机、高速分散器、振荡器、真空泵、恒温水浴锅、721分光光度计、半自动生化分析仪、游泳箱(大小为50cm×50cm×40cm)等。
1．4．2 试剂蒽酮、硫脲、浓硫酸、TCA、葡萄糖、NaF、CuS04、钨酸钠、对羟基联苯、乳酸锂(均为分析纯)、BUN试剂盒(试剂盒为酶法，由上海长征医学科学有限公司生产，批号：000359)。
1．5 实验方法 依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范－2003》中缓解体力疲劳功能检验方法。实验设4个组，即3个实验组和1个阴性对照组，每组11～12只小鼠。采用灌胃法，每天以0.4ml/20g，BW的容量给小鼠灌胃不同剂量的受试物，阴性对照组给予等量蒸馏水。每天1次，连续30天。第31天进行各项抗疲劳指标的测定。
1．5．1 负重游泳试验末次给小鼠受试物30min后，置于游泳箱中游泳，水深约30cm，水温25℃±0.5℃，鼠尾根部负荷5％体重的铅皮。记录小鼠自游泳开始至死亡的时间，作为小鼠负重游泳时间(s)。若实验组游泳时间明显长于阴性对照组游泳时间，且差异有显著性(P＜0.05)，可判定该受试物有延长小鼠负重游泳时间的作用。
1．5．2 血清尿素测定 酶法试剂盒：末次给小鼠受试物30min后，在温度为30℃的水中不负重游泳90min。运动后休息60min后产即拨眼球采血0.5ml，离心取血清加测定血清尿素值。若实验组血清尿素含量明显低于阴性对照组，且差异有显著性(P＜0.05)，可判定该受试物有减少疲劳小鼠尿素产生的作用。
1．5．3 肝糖原测定蒽酮法：末次给小鼠受试物30min后，立即处死．取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干，精确称取肝脏100mg，加入TCA，匀浆、离心，取上清液测定肝糖含量。若实验组肝糖原含量明显高于阴性对照组，且差异有显著性(P＜0.05)，可判定该受试物有促进小鼠肝糖原储备的作用。
1．5．4 血乳酸测定末次给小鼠受试物30min后，分别在游泳前、游泳(运动)后0min、游泳(运动)后休息20min采血20μl进行乳酸测定。血乳酸变化值用下式表示：血乳酸变化值＝1/2X(安静血乳酸值+运动后0min的血乳酸值)X10＋1/2X(运动后Omin的血乳酸值+运动后20rain"的血乳酸值)X20。若实验组血乳酸变化明显低于阴性对照组，且差异有显著性(P＜0．05)，可判定该受试物有减少小鼠运动后血乳酸变化值勤的作用。
1．6 实验数据的数据处理用Stata软件对各实验原始数据--进行方差齐性检验，满足“方差齐”要求的数据资料用单因素方差分析方法和多个实验组和一个对照组均数的两两比较方法进行统计处理；对非正态分布或方差不齐的数据资料进行适当的变量转换，待满足“正态方差齐”要求后，用转换所得的数据进行统计处理。
1．7 结果判定若负重游泳实验结果阳性，且血乳酸、血清BUN、肝糖原三项生化指标中任二项指标阳性，可判定该受试样品具有缓解体力疲劳功能的作用。
2 结果
2．1 样品对小鼠负重游泳时间的影响见表1。比阴性对照组延长，其中高剂量、中剂量组与阴性对照组的差异具有非常显著性意义(P＜0.01)，低剂量组与阴性对照组的差异无显著性意义(P＞0.05)，表明该样品在110、220mg/kg．BW两个剂量组能延长小鼠负重游泳时间。
2．2 样品对小鼠运动后血清尿素水平的影响见表2。
由表2可见，样品各剂量组小鼠血清尿素氮含量均低于对照组，其中高剂量、中剂量组与阴性对照组的差异具有显著性意义(P＜0.05)，低剂量组与阴性对照组的差异无显著性意义(P＞0．05)，表明该样品在110、820mg/kg．BW两个剂量组能减少或抑制疲劳小鼠血清尿素氮产生。
2．3 样品对小鼠肝糖原储备量的影响见表3。组，其中高剂量与阴性对照组的差异具有非常显著性意义(P＜0.01)，中、低剂量组与阴性对照组的差异无显著性意(P＞0.05)，表明该样品在220mg/kg.BW剂量组具有促进糖原储备的作用。
2．4 样品对小鼠运动后血乳酸值的影响见表4。
由表4可见，样品各剂量的血乳酸变化值均低于对照组，其中高剂量、中剂量组与阴性对照组的差异具有极显著性意义(P＜0.01)，低剂量组与阴性对照组的差异无显著性意义(p＞0.05)，表明该样品在110、220mg/kg．BW两个剂量组能降低小鼠运动后血乳酸变化值。
3 小结
运动耐力的提高是抗疲劳能力加强最直接的表现，游泳时间的长短可以反应动物运动疲劳的程度。本实验显示服用三七皂苷30天后，小鼠的游泳时间明显长于未服用的对照组小鼠。机体血尿素氮含量随劳动及运动负荷的增加而增加。机体对负荷的适应能力越差，血尿素氮增加越明显，本研究表明三七皂苷能使机体内血尿素氮减少。糖原是运动中最重要的能源物质，体内糖原的水平与耐力密切相关，当糖原被大量消耗而又得不到及时的补充时，糖酵解产物乳酸过量堆积导致机体内环境失调和代谢过程紊乱，糖原储备的提高有利于机体耐力的提高，肌糖原储备越多，运动可持续的时间越长，本实验表明三七皂苷能使体内肝糖原储备增加，从而使耐力提高。剧烈运动时，机体对能量的需求增加，由于有氧代谢能力的不足，需通过无氧酵解提供能量，同时产生大量的乳酸，使肌组织中H＋离子浓度升高，PH降低，引起一系列生化反应，导致疲劳的产生，血乳酸的清除需有氧的参加。有文献报道，三七皂苷有活血、补血、溶血和抗溶血，并能改善血气循环等作用，本实验亦证明三七皂苷能帮助机体乳酸的清除。上述结果均说明了三七皂苷具有缓解机体疲劳的功能。
